叶下珠复方ⅱ号体内抗鸭乙肝病毒的实验研究

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1、叶下珠复方Ⅱ号体内抗鸭乙肝病毒的实验研究作者：李小月,何金洋,李常青,苏俊芳,董伯振,李向阳【摘要】　　【目的】观察叶下珠复方Ⅱ号体内抗鸭乙型肝炎病毒(DHBV)的作用。【方法】采用聚合酶链反应(PCR)法筛选DHBVDNA阳性的先天感染鸭30只，随机分为5组：病毒对照组,叶下珠复方Ⅱ号高、中、低剂量组(剂量分别为336、186、84g·kg-1·d-1)、拉米夫定组(剂量为20mg·kg-1·d-1)。各组于用药前后分别采用荧光定量PCR法检测血清DHBVDNA含量变化。【结果】在给药第7、14、21、28天及停药后第5天叶

2、下珠复方Ⅱ号高、中剂量组鸭血清DHBVDNA含量显著降低,与给药前和病毒对照组比较差异均有显著性意义(P＜005或P＜001)。【结论】叶下珠复方Ⅱ号具有一定的抑制DHBV复制作用。【关键词】叶下珠复方Ⅱ号/药理学乙型肝炎,慢性/中药疗法乙型肝炎病毒/血液病毒复制疾病模型,动物；鸭　　Abstract:ObjectiveToevaluatetheinvivoeffectofCompoundPhyllanthusurinariaⅡ(CPUⅡ)onduckhepatitisBvirus(DHBV).MethodsThirtyduck

3、swithcongenitalinfectionofDHBV,whichwereDHBVDNApositiveconfirmedbypolymerase9chainreaction(PCR),wererandomlydividedinto5groups:DHBVcontrolgroup,high,middle,andlowdosageCPUⅡgroups(inthedoseof336,186and84g-1·d-1,respectively),andLamivudinegroup(20mg·kg-1·d-1).Theser

4、umDHBVDNAlevelofallduckswasdetectedbyquantityrealtimefluorescencePCRbeforeandaftermedication.ResultsOnthe7th,14th,21st,and28thdayofmedicationandonthe5thdayofsuspensionofmedication,theserumDHBVDNAlevelinbothofthehighandmiddledosageCPUⅡgroupswasobviouslylowerthanthatb

5、eforemedicationandthanthatintheDHBVcontrolgroup(P＜005orP<001).ConclusionCPUⅡhascertaininhibitoryeffectonDHBVreplication．　　Keywords:COMPOUNDPHYLLANTHUSURINARIAⅡ/pharmacology;HEPATITISB,CHRONIC/TCDtherapy;HEPATITISBVIRUS,DUCK/blood;VIRUSREPLICATION；DISEASEMODELS,ANIMA

6、L;DUCKS　　　　叶下珠复方Ⅱ号由叶下珠、苦参、丹参、田三七等组成,具有清热解毒、活血化瘀、健脾补肾作用,临床上主要应用于慢性乙型肝炎和肝纤维化的治疗。前期研究显示［1］：该复方对D9氨基半乳糖所致的化学性肝损伤和刀豆蛋白A所致的免疫性肝损伤均有较好的保护作用。体外实验研究显示［2］该复方有较好的抗乙肝病毒作用。为探讨该复方的体内抗鸭乙型肝炎病毒(DHBV)作用,本研究采用先天感染鸭乙肝动物模型,以荧光定量聚合酶链反应(PCR)法检测用药前后鸭血清DHBVDNA含量变化,现报道如下。　　1　材料与方法　　1.1　实验动物　　1日

7、龄广东麻鸭100只,雄性,购自石井朝阳村孵化场,适应性喂养1d后开始采血。　　1.2　实验药物　　叶下珠复方Ⅱ号组成药物购于广州中医药大学第一附属医院,常规水煎2次,过滤并浓缩至相当于含生药材2g/mL。拉米夫定由葛兰素史克制药(苏州)有限公司生产,批号：08070007。　　1.3　主要试剂及仪器9　　荧光定量PCR试剂盒(TOYOBO公司,探针型)；96孔板及封口膜(广州市美津公司)；ABI7300型荧光定量PCR仪(美国应用生物系统公司)；Minispin台式离心机(上海Eppendorf公司)；SWJC1F超净工作台(上海阳

8、光实验仪器公司)；BDF1600型双恒水平电泳仪(北京东方仪器厂)；Point215凝胶成像分析系统(BIO公司)。　　1.4　DHBVDNA阳性鸭筛选　　从第1次采集的鸭血中分离血清,用DNA提取液