叶下珠复方ⅱ号对小鼠实验性肝损伤的保护作用论文

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1、叶下珠复方Ⅱ号对小鼠实验性肝损伤的保护作用论文【摘要】观察叶下珠复方Ⅱ号对小鼠实验性肝损伤的保护作用。【方法】将NIH小鼠随机分成正常对照组，模型组，叶下珠复方Ⅱ号高、中、低剂量组（剂量分别为110、55、27.5g·kg-1），联苯双酯组（150mg·kg-1）；以刀豆蛋白A(ConA)和D氨基半乳糖（DGalN）分别复制小鼠急性肝损伤模型，用叶下珠复方II号水提液进行干预治疗，并与联苯双酯进行对照，检测小鼠血清谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）及肝组织超氧化物歧化酶（SOD）活性，并观察肝组织病理改变。

2、【结果】叶下珠复方Ⅱ号可显著性降低两种实验性肝损伤小鼠血清ALT和AST活性.freelg，试验时以30g/L的二甲基亚砜溶解，再用蒸馏水稀释至所需浓度；刀豆蛋白A(ConA)为美国华盛顿生物药品公司产品；D氨基半乳糖（DGalN）由重庆医科大学生化教研室生产，批号050326。1.3主要试剂与仪器谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）检测试剂盒均由上海荣盛生物技术有限公司提供，批号为20050125；超氧化物歧化酶（SOD）检测试剂盒购自南京建成生物工程研究所，批号20041108；722型分光光度计（上海第

3、三分析仪器厂）；TLLC台式冷冻离心机（北京四环科学仪器厂）；CK40F200型显微镜（OlympusOpticalCo.Ltd）。1.4ConA致小鼠急性肝损伤模型复制及分组、给药方法［2］将60只NIH小鼠随机分为6组，每组10只，分别为正常对照组，模型组，叶下珠复方Ⅱ号高、中、低剂量组（简称中药高、中、低剂量组，剂量分别为110、55、27.5g·kg-1，相当于20倍、10倍和5倍临床用药剂量），联苯双酯（150mg·kg-1）治疗组。除正常对照组外，其他各组小鼠于实验首日上午尾静脉注射ConA20mg·k

4、g-1，各给药组于首日、次日和第3日上午予小鼠灌胃给药1次；末次给药后4h，模型组和各给药组小鼠再次尾静脉注射ConA20mg·kg-1，禁食不禁水，8h后摘眼球取血，分离血清待检；断头处死动物，取肝左叶组织，一部分用体积分数为40％甲醛溶液固定，另一部分制成匀浆待检。1.5DGalN致小鼠急性肝损伤模型的复制及分组、给药方法［3］分组和剂量设计同1.4，各治疗组小鼠每日灌胃给药1次，连续4d。末次给药后1h，除正常对照组外，其他组小鼠均以DGalN800mg·kg-1腹腔注射，禁食不禁水，24h后摘眼球取血，分离

5、血清待检；断头处死动物，取肝左叶组织，一部分用体积分数为40％甲醛溶液固定，另一部分制成匀浆待检。1.6血浆ALT、AST活性检测采用赖氏法，按试剂盒说明操作，采用722型紫外分光光度计于波长505nm处检测吸光值,制定标准曲线,换算成ALT、AST值。1.7肝组织SOD活性测定将肝组织制成100g/L匀浆，采用黄嘌呤氧化酶法测定SOD活性，按试剂盒说明操作。1.8组织病理学观察以体积分数为40％甲醛溶液固定肝组织,石蜡包埋切片，常规苏木素-伊红(HE)染色,光镜下观察、拍照。1.9统计学方法采用SPSS10.0软件包

6、进行统计分析,多组计量资料分析采用OneentalliverinjuryinmiceinduciblebyconcanavalinA［J］.JClinInvest,1992，90（1）：196.［5］曲建慧,张修礼.小鼠ConA性肝损伤模型［J］.世界华人消化杂志，2001，9(5):571.［6］GantnerF,LeistM,LohseAediatedhepaticinjuryinmice:theroleoftumornecrosisfactor［J］.Hepatology,1995，21(1):190.［7］李

7、影奕，梁刚，李富君，等．氟化物对人多形核白细胞SOD活力变化的影响［J］．中国地方病学杂志，2001，20（2）：81.［8］李宏涛,陈国民.D氨基半乳糖研究的回顾和展望［J］.肝脏,2004,9(3):209.［9］张枫,王家驻,宏顺玉,等.急性肝损伤与肝脏水、电解质及能量代谢的关系［J］.中华消化杂志，1991,11(4)：196.［10］陈文慧,刘平,徐光福,等.脂质过氧化在二甲基亚硝胺大鼠肝纤维化形成过程中的作用［J］.世界华人消化杂志,2001,9(6):645.［11］超志泉,徐顺福,陈图兴,等.休克／再

8、灌注肝损伤中氧自由基的作用［J］.中华消化杂志,1994,14(2):83.