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时间:2018-08-01
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1、EPO对早期糖尿病大鼠肾脏的保护作用【摘要】 目的观察亚临床剂量EPO对糖尿病大鼠早期肾损伤的影响,并探讨其作用机制。方法将大鼠随机分为正常对照组(NC)、糖尿病组(DM)及糖尿病EPO干预的两个剂量亚组(DMTA和DMTB)。采用链脲佐菌素诱导1型糖尿病大鼠模型,腹腔注射EPO10周后,测定血糖、血压、血红蛋白、肾功能;光镜及电镜下观察肾组织形态学变化;免疫组化分析肾组织细胞凋亡相关蛋白Bcl2/Bax及细胞因子VEGF的表达。结果实验剂量EPO干预后,大鼠肾功能及其形态学指标得到显著改善;Bcl2/Bax比值及VEGF表达升高;均
2、呈剂量依赖性。血糖、血压、血红蛋白值与对照组相比无明显变化。结论亚临床剂量EPO可延缓早期糖尿病肾病发展进程,可能与上调Bcl2/Bax蛋白表达比值,抑制肾脏细胞凋亡有关;在本实验条件下,肾组织VEGF的表达上调未对糖尿病肾病造成不良影响。【关键词】糖尿病肾病;促红细胞生成素;细胞凋亡;Bcl2/Bax;血管内皮生长因子;大鼠 ABSTRACT:ObjectiveTostudytheeffectofsubclinicaldosageofEPOonearlyrenallesionsofdiabeticrats.MethodsThera
3、tswererandomlydividedintonormalcontrolgroup(NC),diabeticgroup(DM),diabeticratstreatedwithAdosageEPO(DMTA),anddiabeticratstreatedwithBdosageEPO13(DMTB).DiabeticratsinducedbySTZweregivenEPOintraperitoneallyfor10weeks;thenbloodglucose,bloodpressure,renalfunctionindexes,rena
4、lmorphologicalparameter,theexpressionofcellapoptosisassociatedproteinBcl2/BaxandVEGFweremeasured.ResultsAftertreatmentofEPO,renalfunctionalandmorphologicalindexeswereimprovedsignificantlyandtheratioofBcl2/BaxandVEGFincreased,bothinadosedependentmanner.Bloodsugar,bloodpr
5、essureandhemoglobinconcentrationhadnosignificantdifferences.ConclusionSubclinicaldosageofEPOcouldplayanadvantageousroleindiabeticnephropathy.InhibitionofcellapoptosisbyupregulationofBcl2/BaxexpressionratemayberesponsibleforrenalprotectiveeffectsdespitetheupregulationofVE
6、GF. KEYWORD:diabeticnephropathy;EPO;cellapoptosis;Bcl2/Bax;VEGF;rat13 贫血在糖尿病人群中高发,包括糖尿病早期无明显肾损害的患者[1]。大量研究证实,贫血与糖尿病的微血管及大血管病变的产生和发展,以及患者的住院率和死亡率均有关系,是判断糖尿病及其并发症预后的一大危险因素[2]。糖尿病合并贫血的患者多存在EPO的绝对或相对缺乏[1]。应用外源性EPO治疗时,除了纠正贫血,对早期糖尿病肾病(diabeticnephropathy,DN)发生发展的影响,国内外尚缺乏相关报道
7、。本实验观察亚临床剂量EPO干预对早期DN动物模型的肾功能及肾组织形态学影响,并通过凋亡相关蛋白Bcl2/Bax及血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)的表达来探讨其部分作用机制。 1材料与方法 1.1试剂与仪器 链脲佐菌素(streptozotocin,STZ,Sigma公司),依倍TM注射用重组人促红素(recombinanthumanerythropoietin,rhEPO,成都地奥九泓制药厂),大鼠专用尿白蛋白放免试剂盒(天津九鼎医学生物工程有限公司,批内变异系数为3.1
8、%-5.8%),Bcl2多克隆抗体和Bax多克隆抗体(北京博奥森生物技术有限公司),VEGF多克隆抗体(美国NeoMarkers公司),EliVisonTMplus广谱试剂盒(
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