一株腈水合酶产生菌的筛选_鉴定及培养条件研究

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1、一株腈水合酶产生菌的筛选_鉴定及培养条件研究导读：就爱阅读网友为您分享以下“一株腈水合酶产生菌的筛选_鉴定及培养条件研究”资讯，希望对您有所帮助，感谢您对92to.com的支持!第23卷第4期2008年12月Vol.23No.4Dec.2008一株腈水合酶产生菌的筛选、鉴定及培养条件研究钟莉萍，张锦丽，宋洋，张朝正（天津市工业微生物重点实验室，天津科技大学生物工程学院，天津300457）摘要：以葡萄糖为碳源，逐步增大培养基中丙烯腈浓度进行重复续代培养，从土样中筛选到一株腈水合酶活力较高的菌株．经形态观察和16S,rDNA序列分析，该菌株鉴定为红球菌属（Rhodoco

2、ccus）菌株，命名为Rhodococcussp.TCCC28001．对菌株TCCC28001培养条件进行了初步研究，确定培养基为葡萄糖15,g/L，酵母粉5,g/L，尿素7,g/L，Co2+10×10-5,mol/L.28,℃，180,r/min培养72,h，腈水合酶活力达892,U/mL.14关键词：丙烯腈；腈水合酶；红球菌；菌种鉴定中图分类号：TQ920.1文献标识码：A文章编号：1672-6510（2008）04-0035-05StudyonScreening，IdentificationandCultureConditionsofaStrainwithNi

3、trileHydrataseZHONGLi-ping，ZHANGJin-li，SONGYang，ZHANGChao-zheng（TianjinKeyLaboratoryofIndustrialMicrobiology，CollegeofBiotechnology，TianjinUniversityofScience&Technology，Tianjin300457，China）Abstract：Astrainwithnitrilehydrataseactivity，wasisolatedandscreenedfromsoil，byrepeatedsubculture

4、dinthemediumculturecontainingincreasingacrylonitrileandglucoseasthecarbonsource.Accordingtomorphologyand16SrDNAsequenceanalysis，thestrainisbelongedtogenusRhodococcus，namedasRhodococcussp.TCCC28001.Afteroptimizingthecultureconditions，theoptimumconditionsareasfollows：glucose15,g/L，yeaste

5、xtract5,g/L，urea7,g/L，Co2+10×10-5,mol/L.Asthestrainwasculturedwiththeoptimizedculturemediumandarotationrateof180r/minfor72,hat28,℃，thenitrilehydrataseactivitycouldreach892,U/mL.Keywords：acrylonitrile；nitrilehydratase；Rhodococcus；strainidentification腈（R—CN）是一类重要化合物，其水解反应广泛应用于氨基酸、酰胺（R—CO

6、NH2）、羧酸（R14—[1]COOH）及其衍生物的合成．自然界中一些微生物能利用腈作为生长所必需的碳源和氮源，将腈转化为其他有机物．与化学水解法相比，微生物催化法具有条件温和，环境污染小，腈转化率高等优点，并能实[2,3]现化学选择、区域选择和对映选择．因此从自然界中筛选具有腈转化能力的微生物菌种尤为重要．腈水合酶产生菌的种类多、分布广，目前已应用收稿日期：2008-01-09；修回日期：2008-03-11基金项目：国家科技基础条件平台项目（2005DKA21204-10）作者简介：钟莉萍（1984—），女，江西人，硕士研究生．于丙烯酰胺工业生产的微生物有红球菌

7、（Rhodococcus）、诺卡氏菌（Nocardia）、假诺卡氏菌（Pseudonocarida）、棒状杆菌（Corynebacterium）、假单胞菌（Pseudomonas）、产碱杆菌（Alcaligenes）、短[4]杆菌（Brevibacterium）等．由于腈水合酶对腈类化合物的专一性的不同及其底物的多样性，本文采用丙烯腈为底物从丙烯酸胺生产厂附近的土样中筛选一株腈水合酶产生菌，并进行了鉴定．初步研究了该菌14的培养条件．·36·天津科技大学学报第23卷第4期心，取上清液与4％的乙酰胺溶液等体积混合．1材料与方法材料土样从丙烯酰胺生产厂附近采集．丙烯