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1、共轭亚油酸论文:产共轭亚油酸丙酸菌的筛选及发酵条件研究【中文摘要】亚油酸(LinoleicAcid;LA)是人体必需的三大不饱和脂肪酸之一,作为亚油酸异构体的共轭亚油酸(ConjugatedLinoleicAcid;CLA)因其具有多种重要生理功能而备受关注。目前CLA的生产主要是采用化学法,而利用生物转化法生产CLA也日渐成为研究的热点。本论文通过建立简单的CLA含量测定方法,从食品中分离筛选出产CLA量较高的丙酸菌菌株,并对筛选所得菌株的培养基和发酵转化条件进行优化以提高其产量,本论文的主要研究内容和结果如下:1.自奶
2、酪中筛选获得具有产CLA能力的菌株共13株,其中菌株PF-3的相对最好,其产CLA能力为38.41μg·mL-1。利用气相色谱-质谱联用(GC-MS)对发酵产物进行检测,进一步确认菌株PF-3具备产CLA的能力。通过常规鉴定手段对菌株PF-3进行鉴定,鉴定结果显示该菌株为费氏丙酸杆菌(Propionibacteriumfreudenreichii)。2.对不同的培养基进行了初步优化,确定了MRS培养基作为发酵培养基。通过正交实验和响应面法(RSM)优化研究了丙酸杆菌PF-3发酵生产CLA的培养基成分和发酵条件。得到的最优培
3、养基成分为:蛋白胨(2%)、牛肉膏(1%)、酵母膏(0.5%)、葡萄糖(2.5%)、乙酸钠(0.5%)、柠檬酸铵(0.3%)、磷酸氢二钾(0.2%)、硫酸锰(0.02%)、硫酸镁(0.02%)。最佳发酵条件为:菌体接种量10.2%(v/v),LA添加量0.075%,pH6.75,反应温度31℃,Tween-80作为乳化剂(LA/Tween-80为1:20)的条件下,厌氧振荡培养36h。菌株PF-3在优化后的条件下,其CLA产量为63.58μg-mL-1。【英文摘要】Linoleicacid(LA)isoneofthethr
4、eeessentialunsaturatedfattyacids,theconjugatedlinoleicacid(CLA)whichistheisomeroflinoleicacid,hasrecentlyattractedmuchattentionbecauseofitsimportantvarietyofphysiologicalfunctions.Currently,themainlymethodtoproducingCLAisbychemicalapproaches,andthebiologicaltransf
5、ormationmethodtoproducingCLAisbecomingaresearchhotspot.Inthisthesis,wescreenedPropionibacteriumstrainswithhighCLAproducingcapacityfromfood,thenoptimizedthefermentationmediumandfermentationconditionsbasedonthefastdeterminationmethodofCLA,themaincontentsandresultsof
6、thispaperareasfollows:1.Thereare13strainswhichproducingCLAwerescreenedfromcheese.StrainPF-3,hastherelativelyhighestCLAproducingability,theCLAproductivityisupto38.41μg·mL-1.ThefermentationproductsweredetectedbyGasChromatography-MassSpectrometry(GC-MS),andthestrainP
7、F-3hastheabilitytoproduceCLAbyfutherconfirmed.Accordingtotheanalysisofthecellandcolonymorphologyandphysio-biochemicalcharacteristics,thebacteriumstrainPF-3wasidentifiedasPropionibacteriumfreudenreichiifinally.2.Thedifferentfermentationmediumswereoptimizedprelimina
8、ry,andtheMRSmediumwasdefinedasculturemedium.FermentationconditionstoproduceCLAofstrainPF-3werestudiedbyusingresponsesurfaceanalyticmethodandorthogonalex