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《新城疫病毒和禽流感病毒复合型胶体金免疫层析试纸条的制备》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、新城疫病毒和禽流感病毒复合型胶体金免疫层析试纸条的制备畜牧与兽医2009年第41卷第8期?33?新城疫病毒和禽流感病毒复合型胶体金免疫层析试纸条的制备李蓓蓓,薛强,李锦丰,张帆,邹明强,杨屹h(1.北京化工大学化学系,北京100029;2.中国检验检疫科学研究院,北京100123)摘要:为了建立一种简便,快速而且能同时检测新城疫病毒(NDV)和禽流感病毒(AIV)的方法,本试验采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,分别标记NDV单克隆抗体6C4和AIV单克隆抗体制备免疫检测探针.在硝酸纤维素膜上,用微定量喷头喷好
2、2条病毒检测线(T线)和1条羊抗鼠抗体质控线(c线),制备复合型免疫层析检测试纸条.结果在10min内,可同时检测出两种病毒.试纸条检测NDV的灵敏度比HA试验结果提高8倍;AIV重组抗原的检测灵敏度为1.7g/mL.两种病毒互相测试,未出现交叉反应.用缓冲液对照测试结果为阴性.在密封,干燥,低温的条件下,试纸条的灵敏性与特异性没有明显变化.说明本研究建立的NDV和AIV免疫层析检测法具有特异,灵敏,稳定,操作简单等特点,符合现场快速检测的要求.关键词:新城疫病毒(NDV);禽流感病毒(AIV);金标试纸条;胶
3、体金中图分类号:$851文献标识码:A文章编号:0529—513o(2009)08.0033-05Developmentofacomplexgold-immunochromatographyteststripf0rnewcastlediseasevirusandavianinfluenzavirusLIBei—bei,XUEQiang,LIJin—feng,ZHANGfan,ZOUMing—qiangh,YANGYi(1.DepartmentofChemistry,BeijingUniversityofchem
4、istryandtechnology,Beijing100029,China;2.ChineseAcademyofInspectionandQuarantine,Beijing1000123,China)Abstract:Todevelopasimple,rapidandhighlyefficientimmunochmmatoaphicassayfornewcastlediseasevirus(NDV)andavianin—fluenzavirus(AIV),thesodiumcitratereductionw
5、asusedtomakecolloidalgoldparticleswhichwillconjugatewithNDVandAIVmono-elonalantibodies,respectively,asimmunoassayprobes.Thetestlines(T)forthetwovirusesweresprayedonthenitrocellulosemembrane,whileasheepanti-mouseantibodyqualitycontrolline(C)wassprayed.Thestri
6、pcoulddetecttwovirusessimultaneouslyintenminutes.ThedetectionstripofNDVwasmoresensitivethantheHAtestbyimproving8times,andtherecombinantantigenofAIVcouldstillbede—tectedwhendilutedto1.7g/mL.Twoviruseshadnocross—reactionswitheachother.Withthebufferascontrol,th
7、eresultwasnegative.Thesensitivityandspecificityofstripshadnotchangedwhenstoredunderasealed,dry,lowtemperaturecondition.TheresultsrevealedthatthestripfordetectionofNDVandAIVhashighspecificity,sensitivityandstability,andissuitableforrapiddetectionofthetwovirus
8、esinthefield.Keywords:newcastlediseasevirus;avianinfluenzavirus;immunochromatographicstrip;colloidalgold禽流感(Avianinfluenza,AI)是由禽流感病毒(avianinfluenzavirus,AIV)引起的危及禽类,小型哺乳动物和人类的病毒性传染病,它是以呼吸道症状为主,