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1、花椒多酚类化合物抗自由基抗氧化损伤的研究论文凌智群，万杰，胡苗苗，岑娇，魏萍【摘要】目的观察花椒多酚类化合物总提取物（ZPPC）对活性氧自由基·OH、O2－·和肝脂质过氧化损伤的作用。方法分别利用化学发光法、体外肝匀浆温育Fe2+和H2O2诱导及CCl4肝损伤实验探讨ZPPC对·OH和O2－·的清除作用及检测肝和血浆中超氧化物歧化酶（SOD）活性以及脂质过氧化物丙二醛（MDA）含量。结果ZPPC能有效地清除活性氧自由基；口服低剂量ZPPC能显著降低CCl4中毒小鼠血浆MDA，提高SOD活性。结论适量ZPPC具有抗活性氧自
2、由基和脂质过氧化的作用。【关键词】花椒多酚类化合物自由基抗氧化损伤Abstract：ObjectiveTostudytheeffectsofprocyanidinsextractfromZanthoxylumbungeanumMaxim.(ZPPC)onactiveoxygenradicalsandlipidperoxidation.Methods(1)ThescavengingeffectsofZPPCon·OH,andO2－iluminescencemethod;(2)Thecontentsofmalondialde
3、hyde(MDA)inliverhomogenatesincubatedined;(3)Themicel/kgbentationofZPPC［200,400,800mg/(kgbutase(SOD)andthecontentofMDAinliverandplasmaofCCl4toxicmiceined.ResultsInvitro,ZPPC388.9mg/Land431.22mg/Lhasmarkedactivityon·OHinFentonsystemsandO2－.producedinxanthine/xanthi
4、neoxidaserespectively,andcouldsignificantlydecreasethecontentsofliverMDA.Invivo,ZPPC［200，400mg/(kgbaybeusedasanantioxidantandmighteffectivelyprotectliverfromtheinjuryduetolipidperoxidation.KeybungeanumMaxim.;Polyphenols;Freeradicals花椒为芸香科植物青椒Zanthoxylumschinifoli
5、umSieb.EtZucc.或花椒ZanthoxylumbungeanumMaxim.的干燥成熟果皮，味辛,性温,小毒.freela公司,其余化学试剂均为AR级。超氧化物歧化酶（SOD）、脂质过氧化产物（MDA）测试盒：南京建成生物工程研究所提供。2方法2.1总酚含量的测定采用Folin-Ciocalteu法测定。准确吸取100μl的提取物,.freellNa2CO3溶液,用蒸馏水定容至5ml,摇匀,室温避光反应40min，4000r/min离心10min.,上清液在760nm处测吸光度。结果以100g提取物中含有相当没
6、食子酸的克数表示。2.2羟基自由基(·OH)的产生和清除吸取一定量的ZPPC溶液,50μl60mmol/L2-脱氧核糖,100μl1mmol/LEDTA-FeCl3,100μl1mmol/LVc和100μl1mmol/LH2O2,用200mmol/LpH7.4磷酸盐缓冲溶液定容至1ml,置于37℃水浴锅中反应1h,取出后分别加10﹪三氯乙酸溶液和1﹪硫代巴比妥酸,在80℃水浴中反应15min,冷却后在532nm下测定其吸光度。羟基自由基清除率(%)=（1－A样品/A对照）×100﹪A样品:样品管的吸光值；A对照:对照管的
7、吸光值2.3超氧阴离子(O2－·)的产生和清除用黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶体系产生O2－·,然后加入Luminol试剂［2］和样品,在DA含量的测定参照文献方法［3］，每支试管加10%大鼠肝匀浆0.2ml，给药组每管分别加不同浓度的ZPPC，使其终浓度分别为：4，8，16g/L，对照组加等体积生理盐水，分别加诱导试液FeSO4(5mmol/L)0.1ml，H2O2(10mmol/L)0.1ml，空白对照组加0.1ml生理盐水，37%温育24h，置冰水中冷却后TBA比色法［4］测MDA含量。2.5急性肝损伤实验昆明种小鼠50只，
8、随机分为5组：正常对照组、CCl4中毒组、ZPPC3个不同剂量组［每组小鼠分别灌胃200，400，800mg/（kg·d）］。对照组给等体积生理盐水，连续7d。末次灌胃后24h，除正常对照组给等体积豆油外，其余各组一次灌胃5%CCl4油溶液10ml/kg体重，灌胃后不久，小鼠逐渐表现出中毒症状：行动迟缓，全身蜷缩懒动
