玄参中多酚类化合物的抗氧化活性研究

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1、玄参中多酚类化合物的抗氧化活性研究作者：刘质净，李丽，王晶，闫静，刘春明【摘要】目的采用超声法分别以不同提取时间、不同浓度乙醇水溶液和不同极性提取溶剂对玄参中多酚类化合物进行提取。方法采用Folin-Ciocalteu方法测定玄参不同提取物的总多酚含量，并通过DPPH抗氧化活性体外评价体系测定玄参不同提取物的抗氧化活性、清除自由基的能力。结果40%乙醇提取物的总多酚含量最高，而20%乙醇提取物具有最好的清除DPPH自由基的能力。结论玄参中多酚类化合物具有较好的体外抗氧化活性。【关键词】玄参;抗氧化活性;总多酚;DPPH　　Abstract：Objecti

2、veTostudytheantioxidantactivitiesofpolyphenolicsinScrophularianingpoensisHemsl.MethodsFolin-Ciocaileumethodeasuretheantioxidantactivityofdifferentextracts.ResultsTheTPCsof40%ethanolextractshosl的干燥根，别名元参、黑参、浙玄参、乌元参等。玄参中含有丰富的多酚类化合物[17]。多酚类化合物的主要功能性质是作为许多酶体系的抑制剂或激活剂、金属螯合剂以及自由基清除剂[8，

3、9]。多酚类化合物通过酚羟基的离解和自由基途径产生抗氧化作用[10，11]，是医药、食品、化妆品中很有前景的一类天然抗氧化剂和自由基清除剂。本实验对玄参药材中多酚类化合物的抗氧化活性进行了系统的分析研究，采用Folin-ciocalteu法测定不同提取样品中总多酚的含量，并通过DPPH抗氧化体外评价方法比较不同提取样品清除DPPH自由基的能力，为玄参作为天然抗氧化剂的研究开发提供基础。　　1材料与仪器　　玄参ScrophularianingpoensisHemsl药材购于北京同仁堂长春药店;Folin-Ciocalteu试剂，没食子酸标准品，2,2-di

4、phenyl-1-picrylhydrazyl(DPPH˙)等购自SigmaChemicalCo.公司(St.Louis,Mo);实验所用试剂均为分析纯试剂购于北京北化精细化学品有限责任公司;水为超纯水18.2ΩPa。　　Beckman公司DU800型紫外可见分光光度计;SHB-Ⅲ循环水式多用真空泵(郑州长城科工贸有限公司);BS-124S电子天平(SartoriusAG,Sartorius);加样枪(Germany);HS-Z11-Ⅱ电热蒸馏水器(上海跃进医疗器械厂);旋转蒸发仪(上海爱郎仪器有限公司)。　　2方法与结果　　2.1样品提取分离　　2.1

5、.1常温下不同超声时间提取精密称取干燥至恒重的同一批药材粉末5份，分别称取1.9977，2.0016，1.9964，2.0092，2.0009g，置于具塞锥形瓶中，分别加入80%乙醇50ml，常温下超声提取30，60，90，120，150min，静置，放冷，过滤，残渣用提取溶剂洗涤1次，合并滤液，置旋转蒸发仪减压回收溶剂至干，用50%乙醇3ml溶解，得样品。　　2.1.2常温下不同浓度乙醇提取精密称取干燥至恒重的同一批药材粉末5份，分别取1.9962，2.0072，2.0015，1.9977，2.0010g，置具塞锥形瓶中，分别加入20%，40%，60%

6、，80%，100%乙醇水溶液50ml，常温下超声提取30min，静置，放冷，过滤，残渣用提取溶剂洗涤1次，合并滤液，置旋转蒸发仪减压回收溶剂至干，用50%乙醇3ml溶解，得样品。　　2.1.3常温下不同溶剂提取精密称取干燥至恒重的同一批药材粉末3份，分别取1.9977，2.0002，2.0009g，置具塞锥形瓶中，分别加入80%乙醇、正丁醇、丙酮50ml，常温下超声提取30min，静置，放冷，过滤，残渣用提取溶剂洗涤1次，合并滤液，置旋转蒸发仪减压回收溶剂至干，用50%乙醇3ml溶解，得样品。　　2.2抗氧化活性体外分析实验　　2.2.1样品总多酚含量测

7、定样品总酚含量的测定采用Folin-Ciocalteu方法[12],结果表示为每克样品中含有相当没食子酸的毫克数。吸取0.2ml一定浓度(使吸光度值落在标准曲线上)的样品溶液，加入1ml0.5mol/L的Folin-Ciocalteu试剂,再加入0.8ml7.5%的碳酸钠溶液充分混合，室温下放置0.5h,然后在765nm下测吸光度。用没食子酸溶液(质量浓度范围为0.020.2mg/ml)制作标准曲线,Y=9.5623X-0.1332(R2=0.9999)，如图1所示。所有实验重复两次。　　2.2.2DPPH方法测定样品的抗氧化活性DPPH自由基(二苯代苦

8、味肼基自由基，2-2-diphenyl-1-picry-hydrazylradi