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1、花椒多酚类化合物抗自由基抗氧化损伤的研究的论文作者:凌智群,万杰,胡苗苗,岑娇,魏萍【摘要】 目的观察花椒多酚类化合物总提取物(zppc)对活性氧自由基·oh、o2-·和肝脂质过氧化损伤的作用。方法分别利用化学发光法、体外肝匀浆温育fe2+和h2o2诱导及ccl4肝损伤实验探讨zppc对·oh和o2-·的清除作用及检测肝和血浆中超氧化物歧化酶(sod)活性以及脂质过氧化物丙二醛(mda)含量。结果zppc能有效地清除活性氧自由基;口服低剂量zppc能显著降低ccl4中毒小鼠血浆mda,提高sod活性。结论适量
2、zppc具有抗活性氧自由基和脂质过氧化的作用。【关键词】花椒多酚类化合物自由基抗氧化损伤 abstract:objectivetostudytheeffectsofprocyanidinsextractfromzanthoxylumbungeanummaxim.(zppc)onactiveoxygenradicalsandlipidperoxidation.methods(1)thescavengingeffectsofzppcon·oh,ando2-iluminescencemethod;(2)thecon
3、tentsofmalondialdehyde(mda)inliverhomogenatesincubatedined;(3)themicel/kgbentationofzppc[200,400,800mg/(kgbutase(sod)andthecontentofmdainliverandplasmaofccl4toxicmiceined.resultsinvitro,zppc388.9mg/land431.22mg/lhasmarkedactivityon·ohinfentonsystemsando2-.pr
4、oducedinxanthine/xanthineoxidaserespectively,andcouldsignificantlydecreasethecontentsoflivermda.invivo,zppc[200,400mg/(kgbdaandincreasedtheactivityofsod.conclusionitsuggeststhatzppcmaybeusedasanantioxidantandmighteffectivelyprotectliverfromtheinjuryduetolipi
5、dperoxidation. keybungeanummaxim.;polyphenols;freeradicals花椒为芸香科植物青椒zanthoxylumschinifoliumsieb.etzucc.或花椒zanthoxylumbungeanummaxim.的干燥成熟果皮,味辛,性温,小毒,具有“温中止痛,驱虫,外用燥湿,杀虫止痒”的功效[1],其主要化学成分有生物碱、酰胺、木脂素、香豆素、挥发油和脂肪酸等,而花椒多酚类化合物的相关研究报道较少。.多酚类化合物是广泛存在于植物界的一类具有多种生理功能的活
6、性物质,它不仅具有很强的清除自由基能力,还可以通过抑制氧化酶和络合过渡金属离子等方式起到抗氧化作用。本文以四川汉源花椒为研究对象,研究花椒总多酚类化合物的抗氧化活性,旨在充分挖掘利用该资源。 1材料 1.1动物sd大鼠,雄性180~200g;昆明种小鼠,雄性18~20g,成都中医药大学实验动物中心提供。 1.2样品制备花椒购自四川九襄。粉碎,丙酮-水溶液(7∶3)浸提,减压除去浸提液中丙酮,然后过滤残留水液,将滤液经醋酸乙酯萃取分离,脱水干燥,得到花椒多酚类化合物总粗提取物(zppc),得率为0.033%
7、。zppc为黄棕色粉末,实验前用生理盐水配成所需浓度。 1.3药品黄嘌呤、黄嘌呤氧化酶、3-氨基邻苯二甲酰肼购于sigma公司,其余化学试剂均为ar级。超氧化物歧化酶(sod)、脂质过氧化产物(mda)测试盒:南京建成生物工程研究所提供。 2方法 2.1总酚含量的测定 采用folin-ciocalteu法测定。准确吸取100μl的提取物,加入200μl稀释1倍的酚试剂,混匀,再加入10﹪2mlna2co3溶液,用蒸馏水定容至5ml,摇匀,室温避光反应40min,4000r/min离心10min.,上清液
8、在760nm处测吸光度。结果以100g提取物中含有相当没食子酸的克数表示。 2.2羟基自由基(·oh)的产生和清除吸取一定量的zppc溶液,50μl60mmol/l2-脱氧核糖,100μl1mmol/ledta-fecl3,100μl1mmol/lvc和100μl1mmol/lh2o2,用200mmol/lph7.4磷酸盐缓冲溶液定容至1ml,置于37℃水浴锅中反应1h,取出后分别加