花椒多酚类化合物抗自由基抗氧化损伤的研究

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1、花椒多酚类化合物抗自由基抗氧化损伤的研究作者：凌智群，万杰，胡苗苗，岑娇，魏萍【摘要】　　目的观察花椒多酚类化合物总提取物（ZPPC）对活性氧自由基·OH、O2－·和肝脂质过氧化损伤的作用。方法分别利用化学发光法、体外肝匀浆温育Fe2+和H2O2诱导及CCl4肝损伤实验探讨ZPPC对·OH和O2－·的清除作用及检测肝和血浆中超氧化物歧化酶（SOD）活性以及脂质过氧化物丙二醛（MDA）含量。结果ZPPC能有效地清除活性氧自由基；口服低剂量ZPPC能显著降低CCl4中毒小鼠血浆MDA，提高SOD活性。结论适量ZPPC具有抗活性氧自由基和脂质过氧化的作用。【关键词】花椒多酚类化合物自由

2、基抗氧化损伤　　Abstract：ObjectiveTostudytheeffectsofprocyanidinsextractfromZanthoxylumbungeanumMaxim.(ZPPC)onactiveoxygenradicalsandlipidperoxidation.Methods(1)ThescavengingeffectsofZPPCon·OH,andO2－iluminescencemethod;(2)Thecontentsofmalondialdehyde(MDA)inliverhomogenatesincubatedined;(3)Themicel/kg

3、bentationofZPPC［200,400,800mg/(kgbutase(SOD)andthecontentofMDAinliverandplasmaofCCl4toxicmiceined.ResultsInvitro,ZPPC388.9mg/Land431.22mg/Lhasmarkedactivityon·OHinFentonsystemsandO2－.producedinxanthine/xanthineoxidaserespectively,andcouldsignificantlydecreasethecontentsofliverMDA.Invivo,ZPPC［

4、200，400mg/(kgbaybeusedasanantioxidantandmighteffectivelyprotectliverfromtheinjuryduetolipidperoxidation.　　KeybungeanumMaxim.;Polyphenols;Freeradicals花椒为芸香科植物青椒ZanthoxylumschinifoliumSieb.EtZucc.或花椒ZanthoxylumbungeanumMaxim.的干燥成熟果皮，味辛,性温,小毒，具有“温中止痛，驱虫，外用燥湿，杀虫止痒”的功效［1］，其主要化学成分有生物碱、酰胺、木脂素、香豆素、挥发

5、油和脂肪酸等，而花椒多酚类化合物的相关研究报道较少。多酚类化合物是广泛存在于植物界的一类具有多种生理功能的活性物质,它不仅具有很强的清除自由基能力,还可以通过抑制氧化酶和络合过渡金属离子等方式起到抗氧化作用。本文以四川汉源花椒为研究对象，研究花椒总多酚类化合物的抗氧化活性，旨在充分挖掘利用该资源。　　1材料　　1.1动物SD大鼠，雄性180～200g；昆明种小鼠，雄性18～20g，成都中医药大学实验动物中心提供。　　1.2样品制备花椒购自四川九襄。粉碎，丙酮-水溶液(7∶3)浸提，减压除去浸提液中丙酮，然后过滤残留水液，将滤液经醋酸乙酯萃取分离，脱水干燥，得到花椒多酚类化合物总粗

6、提取物（ZPPC）,得率为0.033%。ZPPC为黄棕色粉末，实验前用生理盐水配成所需浓度。　　1.3药品黄嘌呤、黄嘌呤氧化酶、3-氨基邻苯二甲酰肼购于Sigma公司,其余化学试剂均为AR级。超氧化物歧化酶（SOD）、脂质过氧化产物（MDA）测试盒：南京建成生物工程研究所提供。　　2方法　　2.1总酚含量的测定　　采用Folin-Ciocalteu法测定。准确吸取100μl的提取物,加入200μl稀释1倍的酚试剂,混匀,再加入10﹪2mlNa2CO3溶液,用蒸馏水定容至5ml,摇匀,室温避光反应40min，4000r/min离心10min.,上清液在760nm处测吸光度。结果以1

7、00g提取物中含有相当没食子酸的克数表示。　　2.2羟基自由基(·OH)的产生和清除吸取一定量的ZPPC溶液,50μl60mmol/L2-脱氧核糖,100μl1mmol/LEDTA-FeCl3,100μl1mmol/LVc和100μl1mmol/LH2O2,用200mmol/LpH7.4磷酸盐缓冲溶液定容至1ml,置于37℃水浴锅中反应1h,取出后分别加10﹪三氯乙酸溶液和1﹪硫代巴比妥酸,在80℃水浴中反应15min,冷却后在532nm下测定其吸光度。羟基自由基清除率(%)=（