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时间:2018-07-07
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1、灯盏细辛对神经细胞尼古丁受体表达的影响及其神经保护作用研究论文齐晓岚,黄勇,王永林,王爱民,官志忠【摘要】目的研究中药灯盏细辛对神经母细胞瘤(SH-SY5Y)细胞神经型尼古丁受体表达的影响及其对抗β淀粉样蛋白(Aβ)神经毒性作用机制。方法采用比色法测定细胞MTT还原率筛选药物浓度安全范围,选取一定浓度的灯盏细辛乙醇提取物醋酸乙酯部位处理SH-SY5Y细胞后,再加入Aβ1-42处理,测定MTT还原率.freelan比色法测定细胞培养基中乙酰胆碱酯酶(Acetylcholinesterase,AChE)及丁酰胆碱酯酶(Butyrylcholines
2、terase,BuChE)活性。结果灯盏细辛乙醇提取物醋酸乙酯部位能提高细胞α3及α7尼古丁受体亚单位蛋白质表达水平;降低细胞乙酰胆碱酯酶活性;并能对抗Aβ引起的MTT还原率降低。结论灯盏细辛乙醇提取物醋酸乙酯部位能上调尼古丁受体亚单位蛋白表达水平,降低细胞乙酰胆碱酯酶活性,且能对抗Aβ的神经毒性作用,在阿尔茨海默氏病的治疗中可能起到一定作用。【关键词】灯盏细辛;SH-SY5Y细胞;尼古丁受体;β-淀粉样蛋白;胆碱酯酶;阿尔茨海默氏病Abstract:ObjectiveToinvestigatetheeffectsofHerbaErigerom
3、tisontheexpressionofnicotinicacetylcholinereceptor(nAChR)andtheanti-neurotoxicitymechanismofthedrugbyusingneuroblastomaSH-SY5Ycellstreatedyloidpeptide.MethodsTheSH-SY5Ycellsitis,andthenexposedtoAβ1-42.MTTreductionassayitisandtounderstandtheinfluencesofthedrugsoncellularviabi
4、lityresultedfromthetreatmentofAβ;expressionsofα3andα7nAChRsubunitsatproteinlevelediumseaturedbyanimprovedEllman‘scolorimetricmethod.ResultsHerbaErigeromtisstimulatedincreasesofα7andα3nAChRproteinsintheculturedcells;decreasedtheactivityofAChEandinhibitedthedecreasedMTTreducti
5、onresultedfromAβ.ConclusionHerbaErigeromtiscanupregulatetheexpressionofnAChRsubunitsatproteinlevel,decreasetheactivityofAChEandpreventthedecreasedMTTreductioninducedbyAβ.ThedrugsmightplayanimportantroleintherapeuticstrategyofAD.Keyyloidpepitide;Alzheimerdisease;cholinesteras
6、e;HerbaErigeromtis阿尔茨海默氏病(Alzheimer'sdisease,简称AD)是一种主要在老年期发生的以进行性痴呆为主要特征的神经元退行性变疾病,其主要临床表现为进行性认知功能障碍、记忆力衰退、性格和行为改变等[1~3]。近一个世纪以来,众多的科学家就AD的病因及发病机制进行了大量的研究,但其发病机制至今尚不十分清楚。目前认为AD是由遗传学因素、环境因素和代谢因素等多种因素共同作用所引起的一种疾病,病理学上以脑细胞内神经原纤维缠结及细胞外老年斑形成为主要特征[1]。老年斑的主要成分为β淀粉样蛋白,是一种神经毒性物质,可以引
7、起神经元的损伤和死亡,是AD发病过程中的一个重要因素,能促进AD的发生和发展。神经型尼古丁乙酰胆碱受体(Nicotinicacetylcholinereceptor,nAChR)(或称尼古丁受体)与学习和记忆等认知功能密切相关,并具有明显的神经保护作用[4]。在较早的一些研究中就发现,AD患者大脑皮层nAChR出现持续和严重的丢失,大脑皮层nAChR缺失与AD患者认知障碍有显著的相关性。胆碱酯酶(Cholinestease,ChE)是一类丝氨酸水解酶,其功能主要为水解兴奋性神经递质乙酰胆碱。可分为两类,乙酰胆碱酯酶(Acetylcholines
8、terase,AChE)与丁酰胆碱酯酶(Butyrylcholinesterase,BuChE)。近几年的研究表明,AChE和BuChE在AD的发病过
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