不同途径骨髓基质干细胞移植治疗小鼠糖尿病效果的论文

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1、不同途径骨髓基质干细胞移植治疗小鼠糖尿病效果的论文不同途径骨髓基质干细胞移植治疗小鼠糖尿病效果【关键词】骨髓祖代细胞;骨髓移植;糖尿病;小鼠【摘要】目的研究不同途径骨髓基质干细胞(bmscs)移植对小鼠糖尿病治疗效果。方法分离骨髓，贴壁培养并纯化和扩增bmscs。腹腔注射链脲佐菌素建立小鼠糖尿病动物模型。取2×105个第3代bmscs，对模型鼠分别进行胰腺内多点注射、尾静脉移植以及肾被膜移植。动态观察移植后小鼠的血糖、体质量及行为的变化。结果与糖尿病对照组相比，胰腺移植组、尾静脉移植组和肾被膜移植组小鼠的糖尿病症状有所改善，血糖明显降低(f=32.58～48.35，q=10

2、.06～14.98,p<0.05)，以胰腺移植组血糖下降更为显著。结论3种途径bmscs移植对小鼠糖尿病均有治疗作用。【关键词】骨髓祖代细胞;骨髓移植;糖尿病;小鼠　therapeuticeffectofdifferentpatharroesenchymalstemcellsondiabetesinmicejiayueentofhistologyandembryology,qingdaouniversitymedicalcollege,qingdao266021,china);[abstract]objectivetostudythetherapeuticeffe

3、ctsofdifferentscstransplantationondiabeticmice.methodsmousebmscsodelofdiabetesinmicescsofthirdgenerationscs.resultsparedptomsofthosetreatedscstransplantationimprovedandbloodsugardecreased(f=32.58-48.35,q=10.06-14.98,p<0.05),especiallyforthosereceivedbmscstransplantationinthepancreas.con

4、clusionallthethreescstransplantationentofdiabetesinmice.　　[keyyeloidprogenitorcells;bonemarroellitus;mice　　目前，传统治疗糖尿病的方法只能减轻症状，但不能根治，病人一般需要终身治疗，给工作和生活带来了极大的不便。.cOm由于给药过程中病人缺乏理想的血糖感应系统，常导致全身性代谢紊乱并继发眼、肾、神经、心血管等重要器官损害。胰岛移植是治愈1型糖尿病最有希望的方法，但是由于供体不足和免疫排斥反应等问题，始终不能广泛应用于临床。干细胞具有极强的自我更新能力及多向分化的潜能，能

5、形成各种组织的早期未分化细胞，是各类疾病细胞治疗和基因治疗的首选种子细胞[1]。骨髓基质干细胞(bmscs)取材方便，体外易扩增，不涉及伦理问题，免疫排斥反应轻，具有向骨细胞、脂肪细胞、软骨细胞、心肌细胞、神经细胞、胰岛素分泌细胞等多向分化的能力[25]。因此，bmscs可能成为细胞移植治疗糖尿病的理想的细胞来源。目前有关干细胞在胰腺内分化的研究，主要采用尾静脉移植、肾被膜移植、肝门静脉移植、胰腺内多点注射进行干细胞移植，其研究侧重于探索干细胞移植后胰腺基因和蛋白的表达，很少进行功能学方面的研究。本实验重点对比研究了胰腺内、尾静脉和肾被膜3种途径进行bmscs移植对糖尿病

6、的治疗效果。　　1材料和方法　　1.1材料　　取emlg培养基购自gibco公司;胎牛血清购自杭州四季青公司;胰蛋白酶购自sigma公司;链脲佐菌素(stz)购自sigma公司。怡成jps5型血糖仪购自怡成生物电子技术有限公司。　　1.2方法　　1.2.1大鼠bmscs的分离、培养和标记采用颈椎脱臼法将emlg培养液反复冲洗骨髓腔。将收获的骨髓制成单细胞悬液。调整细胞密度为1×1010/l，接种于50ml培养瓶中，在37℃、体积分数0.05、饱和湿度的co2培养箱中培养。24h后换液，除去未贴壁的细胞，每隔3d换液一次。当细胞达到80%融合时传代。在第3代bmscs培

7、养第3天时加10μl的brdu溶液(brdu50mg，二甲基亚砜0.8ml，双蒸水1.2ml)[6]。　　1.2.2糖尿病动物模型的建立取昆明种小鼠25只，雌雄各半，给药前禁食12h，按180mg/kg剂量一次性腹腔注射stz[7]。stz注射前用ph4.5的0.1mmol/l柠檬酸钠缓冲液配制成10g/l的溶液。稳定3d后，随机检测血糖，血糖连续2次大于16.7mmol/l，出现糖尿病症状，说明造模成功。小鼠造模时死亡1只。　　1.2.3干细胞移植将24只糖尿病小鼠分为胰腺移植组、尾静脉移植组、肾被膜移植组及糖尿