皂角粉中提取皂角苷

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1、从皂角中皂角苷的提取和纯化2012级生物科学四班林凯纯135604949282012级生物技术赵永亮15521037062摘要皂荚（GleditsiasinensisLam.），又名皂荚树、皂角等，属蔷薇目，豆科落叶乔木或小乔木。所结果实为皂荚果，皂荚果皮含有丰富的皂角苷，皂角苷是洗涤剂、乳化剂等洗涤用品的天然材料，皂角苷是非离子型表面活性剂，是一种优良的天然表面活性剂，极易溶于水，洗洁性好，温和无刺激，无害残留物少，对人体伤害几乎为零，目前已经广泛应用于日化、医药等方面。本实验将利用回流提取及系统溶剂萃取法从皂角中提取皂角苷，并利用香草醛—硫酸

2、显色并利用分光光度计测定提取效率。关键字：皂角苷、提取、纯化1.前言皂角苷是非离子表面活性剂、广泛应用于洗涤剂、乳化剂、是应用广泛，性质温和的天然产物之一，有很高的应用价值，工业上有比较成熟的提取方法。本实验小组想了解并运用较为简易的提取天然皂角苷的方法，并将产物纯化，计算本方法的提取的提取效率。2.实验目的：1.锻炼生化实验技能2.熟悉分离提取纯化基本方法3从皂角中提取皂角苷4测算皂角中提取皂角苷的提取效率53.实验原理3.1皂角苷的提取本实验应用回流提取法，是应用于大多数有机溶剂沸点较低的特点，通过水域蒸馏，使溶剂气化，冷却后液化回流提取筒，

3、从而不断从皂荚中提取成分，这种方法器材要求简单，操作方便，提取连续性好，安全系数高。3.2皂角苷的纯化本实验应用系统溶剂萃取法，皂角苷在含水丁醇或戊醇中溶解度大，且能与水分成两相，可利用此性质从皂角苷水溶液中用丁醇或戊醇提取皂角苷，借与亲水性大的汤、蛋白质等分离，在初步提取后，回收溶剂，将残渣溶于水，滤除不容物，再利用皂角苷不溶于乙醚等强亲脂性的有机溶剂作两相萃取，将油脂、脂溶性色素除去。4.实验设备索式提取器（可自行组装圆底烧瓶、冷凝管、胶管、止水夹等）、恒温水浴锅、烧杯、电热炉、玻璃棒、试管、漏斗、滤纸、温度计、电子天平、分光光度计、比色杯5

4、.实验材料及试剂5.1实验材料皂角粉（皂荚研磨制成）5.2试剂乙醇、正丁醇、乙醚、77%浓硫酸、香草醛、纯水、皂角苷标准品6.实验操作步骤6.1皂角苷提取用滤纸制作圆柱状滤纸筒,称取10g皂角粉,装入滤纸筒中,将开口端折叠封住,放入提取筒中.将150ml圆底烧瓶安装于水浴锅上,放入2粒沸石,量取95%乙醇100ml,从提取筒中倒入烧瓶,安装好索氏提取装置,打开电源,加热回流2小时.实验时能够观察到,随着回流的进行,当提取筒中回流下的乙醇液的液面稍高于索氏提取器的虹吸管5顶端时,提取筒中的乙醇液发生虹吸并全部流回到烧瓶内.然后再次回流,虹吸,记录虹

5、吸次数.虹吸5-6次后,当提取筒中提取液颜色变得很浅时,说明被提取物已大部分被提取,停止加热,移去水浴锅,冷却提取液。6.2皂角苷的纯化用乙醇提取后，回收溶剂（将乙醇蒸干、在通风厨进行）将残渣溶于水，滤去不溶物，检查分液漏斗是否漏水，确认不漏水后，将水溶液加入分液漏斗中，后加入50ml乙醚，震荡，静置分层，弃去油层，留下液层，在分液漏斗内加入50ml正丁醇，震荡，静置分层，弃去水层，收集正丁醇溶液，蒸干，得到粗皂角苷，重复2-3次以上得到精致皂角苷粉产物。6.3建立标准曲线取油茶皂角苷标准品20mg，用乙醇溶解并移至10ml容量瓶中，稀释至10m

6、l，取此液0.1，0.2，0.3，0.4，0.5，0.6ml，分别置于带塞试管中，并加水至溶液体积均为0.5ml，精密加入8%香草醛溶液0.5ml，于冰水中冷却加入77%硫酸溶液4ml，摇匀，混台物于60℃加热15min，然后于冰水中冷却10min，取出置于室温下，以试剂空白为参比溶液，用1cm比色皿在波长550nm处测定吸光度，以吸光度与标准溶液质量浓度P(mg／ml)，根据测得数据建立标准曲线。6.4皂角苷纯度测定取提取的皂角苷1mg加入置于带塞试管中，并加水至溶液体积均为0.5ml，精密加入8%香草醛溶液0.5ml，于冰水中冷却加入77%硫

7、酸溶液4ml，摇匀，混台物与标准物同时于60℃加热15min，然后于冰水中冷却10min，取出置于室温下。在550nm波长下测定吸光度，根据所得标准曲线方程得出皂角苷纯度。6.5皂角苷提取效率计算根据所得数据计算皂角苷的提取效率7.结果及计算提取效率=A—根据标准曲线测得浓度M—提取的得到的皂角苷质量8.注意事项58.1提取纯化1.提取过程中涉及到有机溶剂的浓缩，回收，应在通风橱或通风良好的地方进行提取纯化。2.实验用量较少且涉及产率计算，实验室用精确度较高的电子天平，最大限度的减小误差小8.2建立标准曲线1.本实验应用香草醛-硫酸法显色皂角苷，

8、香草醛有毒性应小心处理，硫酸浓度为77%，浓度较高，操作时应小心，且配置时应在通风橱内进行。9.费用预算项目单价数量价格皂角苷标准品67