lcmsms农药一齐分析法(i)

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1、1.适用范围适用于制品，蔬菜中LCMSMS农药的一齐分析法（Ⅰ）中农药的检测。2.编制依据依据日本厚生劳动省《LCMS农药一齐分析法Ⅰ》编制。3.方法原理试样用乙腈溶液提取后，经过净化、浓缩，用50%的甲醇定容后用LCMSMS测定，外标法定量。4.试剂4.1乙腈，色谱级4.2乙酸乙酯，色谱级4.3丙酮，色谱级4.4氯化钠，优级纯4.5无水硫酸钠，分析纯4.6甲苯，色谱级4.7磷酸缓冲液将磷酸二氢钾54.8g，磷酸氢二钾17.5g溶于1L蒸馏水中，PH约为6.05.仪器设备5.1WatersLCMSMSTQD5.2食品加工器5.3菜刀，案板5.4电子天平5.5均质机5.6布氏漏

2、斗，分液漏斗，普通漏斗，滤纸5.7梨形瓶（250ml，100ml）5.8锥形瓶（200ml，100ml）5.9C181G6ML柱5.10氨基复合柱Carbon/NH2500MG6ML5.11真空泵5.12旋转蒸发仪5.13氮吹仪5.14玻璃离心管（10mL）5.15分液漏斗振荡器5.16移液枪（1mL，200μL）6.分析步骤6.1试料的制备（除不加样品外，试剂空白与样品同步处理）将送交实验室的不少于200克的样品于食品加工器搅细（对于大块状的样品可先用17刀切成小块，再放于食品加工器中搅细）。粉碎后的样品装于一次性的塑料袋中备用。6.2提取准确称取10.0g（精确到0.1g

3、）搅细的样品（原料称取10.0g）于均质杯中，加入70mL乙腈，以5000~10000rpm的速度均质5min,后过滤至200ml锥形瓶中；残渣中加入30mL乙腈，再过滤；两次提取滤液合并到含有7gNaCl的分液漏斗中；用20ml磷酸缓冲液，冲洗锥形瓶后倒入分液漏斗中；震荡5分钟，静置分层，取乙腈层（上层）；6.3浓缩将乙腈层在40°C下减压浓缩至约20mL6.4净化用乙腈10mL活化固相萃取柱（BE-C18）；将约20ml样品液过萃取柱后，用3mL乙腈冲洗容器，并作为溶出液过柱子，溶出液约23ml用三角瓶接收；6.5干燥向三角瓶中加无水硫酸钠3-4勺干燥约15min；过滤，

4、用40mL乙酸乙酯（10~20ml×2~3回）洗涤三角瓶，过滤，合并滤液；将滤液在40°C下减压条件下浓缩，不要完全蒸干6.6净化用1：3的甲苯：乙腈混合液10mL活化固相萃取柱（EVNI-Carb/LCNH2）；样品用3ml1：3的甲苯、乙腈混合液超声溶解，过萃取柱后，用（3+17）mL1：3的甲苯、乙腈混合液冲洗容器，并作为溶出液过柱子（分两次）收集溶出液；6.7浓缩将溶出液在减压条件下浓缩至近干，用2mL丙酮溶解，取1mL于玻璃离心管中，氮吹至近干，用5mL50%的甲醇水溶液溶解，超声溶解，取1.5ml于1.5mLEP管中10000rpm，10min，离心，取上清液过0

5、.22μm尼龙滤膜过滤，移入样品瓶中待测。177.分析条件7.1仪器条件UPLC条件WatersACQUITYUPLCl移动相A5mM醋酸铵（AcNH4）水溶液B5mM醋酸铵（AcNH4）甲醇溶液l色谱柱ACQUITYUPLCBEHC181.7μm（2.1mm*100mm）l温度色谱柱温度40℃l样品柜温度温度5℃l泵（LC梯度程序）流速0.3mL∕minTime(min)A(%)B(%)0.090102.0505011.0208012.529814.029814.19010RunTime17.0l进样量注入量5μL（部分环针溢出进样）7.2MS条件lLC/MS/MS仪器条件

6、TQDetectornCapillary1.50kVnCone10VnExtractor3VnRFLens0.1VnSourceTemp150℃nDesolvationTemp400℃nDesolvationGasFlow900L/hrnConeGasFlow50L/hrnLMResolution111.0nHMResolution111.0nCollisionGasFlow0.15mL/min17称取样品10.0g乙腈70ml5000-10000转/min，5min过滤至200ml锥形瓶中残渣中加入30ml乙腈过滤合并滤液到含有7gNaCl的分液漏斗中震荡5分钟，静置分层，

7、取乙腈层（上层）乙腈层40°C下减压浓缩至约20mL固相萃取柱（BE-C18）净化20ml磷酸缓冲液，冲洗锥形瓶后倒入分液漏斗乙腈10mL活化3mL乙腈冲洗容器作为溶出液过柱约20ml样品液过萃取柱溶出液约23ml用三角瓶接收三角瓶中加无水硫酸钠3-4勺干燥约15min后过滤40mL乙酸乙酯（10~20ml×2~3回）洗涤三角瓶，过滤，合并滤液滤液在40°C下减压条件下浓缩至近干固相萃取柱（EVNI-Carb/LCNH2）净化1：3的甲苯、乙腈混合液10mL活化3ml1：3的甲苯、乙腈超声溶解，过萃取柱