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1、负载抗原DCCIK细胞对NDV修饰抗原胃癌细胞杀伤作用的论文负载抗原dccik细胞对ndv修饰抗原胃癌细胞杀伤作用【关键词】胃肿瘤;抗原,肿瘤;免疫疗法;树突细胞;杀伤细胞;新城疫病毒【摘要】目的探讨负载sgc7901细胞抗原的dccik细胞对新城疫病毒(ndv)修饰sgc7901细胞的杀伤作用,探索胃癌新的治疗方法。方法取健康成人外周血分离单个核细胞,用于诱导培养树突状细胞(dc)及细胞因子诱导的杀伤细胞(cik细胞)。用反复冻融法制备胃癌细胞抗原,用于致敏dc细胞。然后分以下4组进行试验:cik组、dccik组、c
2、ik+ndv组、dccik+ndv组,同时设单独的靶细胞对照(sgc7901)和效应细胞对照(cik、ndv、dccik)。并与化疗药(氟尿嘧啶、顺铂)对sgc7901细胞的杀伤作用进行比较。结果用ndv修饰抗原后,无论是cik细胞还是dccik细胞对sgc7901细胞的杀伤率均增高。其中负载胃癌细胞抗原的dccik细胞杀伤率最高,效靶比为20∶1时,达到83.4%。化疗药物作用48h时的疗效也不如单纯cik细胞作用24h的疗效。结论负载sgc7901细胞抗原的dccik细胞对经ndv修饰抗原的sgc7901细
3、胞的杀伤效果最佳。胃癌的生物治疗效果优于普通化疗。【关键词】胃肿瘤;抗原,肿瘤;免疫疗法;树突细胞;杀伤细胞;新城疫病毒 thecytotoxiceffectofantigenpulseddccikcellsonndvmodifiedgastriccarcinomacellsliuxichun,jianghaitao,maoentofgeneralsurgery,theaffiliatedhospitalofqingdaouniversitymedicalcollege,qingdao266003,china);[abs
4、tract]objectivetostudythecytotoxicactivityofsgc7901pulseddccikcellsonneodifiedsgc7901cells,andexploreanea.methodsmononuclearcellsperipheralbloodofhealthyadults,andusedforinductionintodendriticcells(dc)andcytokineinducedkiller(cik)cells.gastriccarcinomaantigenobtai
5、nedthroughrepeatedfreezingandthaentincludedfourexperimentgroups:cik,dccik,cik+ndvanddccik+ndv,andtotherapeuticagents(fluorouracil,cisplatin)onsgc7901cells.resultsthecytotoxicactivitiesofbothcikanddccikcellsagainstsgc7901cellsodifiedbyndv.thecytotoxicityofdccikpu
6、lsedotherapeuticagents,evenafter48hoursoftreatment,ent.conclusionthecytotoxicactivityofsgc7901pulseddccikcellsagainstndvmodifiedsgc7901cellsachcancerotherapy. [keyachneoplasms;antigens,neoplasm;immunotherapy;dendriticcells;killercells;necsf,购自厦门特宝生物工程股份有限公司),重
7、组人白细胞介素4(rhil4,购自北京军事医学科学院),淋巴细胞分离液(ficoll,购自中国医学科学院生物工程研究所)。 1.2方法 1.2.1冻融法制备sgc7901细胞抗原消化收集对数生长期的sgc7901细胞,用pbs液离心洗涤两次,再用pbs液重悬为1×1010/l,封装入冻存管。置液氮内冷冻10min,取出后立即置37℃水浴10min,重复3次。然后,以10000r/min离心30min,取上清液-20℃保存备用。齐鲁医学杂志2010年10月第25卷第5期medjqilu,october2010,vol.25
8、,no.5 1.2.2dc的诱导和扩增取健康献血者50ml肝素抗凝外周血用ficoll密度梯度离心,分离单个核细胞。用含体积分数为0.10胎牛血清的rpmi1640培养液调整细胞密度为2×109/l,然后以每孔1ml加入24孔培养板中,置37℃