负载抗原的DC与CIK共培养对肝癌细胞的杀伤作用.pdf

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1、检验医学与临床2014年6月第11卷第12期IabMedClin，June2014，Vo1．11，No．12·论著·负载抗原的DC与CIK共培养对肝癌细胞的杀伤作用徐巧元，杨志祥，罗阔(1．重庆市第五人民医院肿瘤科400062；2．重庆市中山医院肿瘤科400013)【摘要】目的探讨负载抗原的树突状细胞(I)C)与杀伤细胞(CIK)细胞共培养对肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响。方法采用粒细胞一巨噬细胞集落刺激因子(GM—CSF)、重组人白细胞介素一4(II～4)、肿瘤坏死因子一a(TNF_q)诱导健康自愿者外周血中的贴壁细胞产生成熟树突状细胞(DCs)，并用HeF，

2、G2细胞裂解产物将其致敏。用CD3单抗、干扰素一7(IFN一7)、白细胞介素一2(IL-2)诱导悬浮细胞产生细胞因子激活的cIK细胞。采用流式细胞术检测IX；、CIK细胞的表型和肝癌HepG2细胞的凋亡，利用CellCountingKit一8(CCK一8)试剂检测肝癌HepG2细胞的增殖。结果与未负载抗原的DC—CIK比较，负载抗原的DC_CIK表面分子表达增高，对HeF·G2细胞增殖活力抑制作用更明显，同时诱导癌细胞凋亡能力更强。结论负载抗原的DC细胞能显著提高CIK细胞的抗癌效应。【关键词】负载抗原；DC—CIK；HepG2细胞；增殖；凋亡DOI：10．3969

3、／j．issn．1672-9455．2014．12．006文献标志码：A文章编号：1672—9455(2O14)12—1605—03ThekillingeffectofCIKcellscombinedwithantigen-loadedDConlivercancercellsXUQiao—yuan。YANGZhi-xiang，LU0Kuo(1．DepartmentofOncology，ChongqingFifthPeoplesHospital，Chongqing，400062，China；2．DepartmentofOncology，ChongqingZhongsh

4、anHospital，Chongqing400013，China)·[Abstract]ObjectiveToexploretheeffectofcytokineinducedkmer(CIK)cellsandantigen—loadedDC(DCs)onproliferationandapoptosisinhumanlivercancercelllineHepG2．MethodsAdherentcellsfromperipheralbloodofhealthyvolunteerswereinducedbyGM—CSF，IL一4，TNF—toprepareDCs，w

5、hichweresensitizedwithHepG2celllysates．Meanwhile，suspendedcellswereinducedbyCD3monclonalantibody，IFN一7，IL一2toprepareCIKceils．TheimmunophenotypeofDCsandCIKcellsandtheapoptosisofHepG2cellswereanalyzedbyflowcytometry．TheIFN一andTNF-ⅡlevelsineellculturedsupernatantwereexaminedwithEIISA．Then

6、，theproliferationofHepG2cellswasdetectedbvCCK一8．ResultsComparewithDC—CIK，antigen-loadedDCincreasedthemarkersexpressionofCIKcells，strengthentheanti—proliferationeffectofC1KonHepG2cellsandenhancedHepG2cellapoptosis．ConclusionAntigen—loadedDCcanenhancesignificantlytheanti—cancereffectofCI

7、Kcellsonlivercancercellline．[Keywords]antigen-loaded；DC—CIK；HepG2cells；proliferation；apoptosis肝癌是最常见的恶性肿瘤之一，在肿瘤相关性病死中位居自深圳达科为生物有限公司；FITC标记的CD3、CD8、CD56、第2，仅次于肺癌。肝癌恶性程度高，进展迅速，易发生浸润和CD80、CD83、CD86和主要组织相容性复合体U(MHCII)单克转移。手术根治性切除率低，复发率较高。肝癌患者免疫功能隆抗体购自美国eBioscience公司；II一2和IFN一7的ELISA试低下，导