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《DC与CIK共培养对肝癌细胞杀伤活性的研究.doc》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、DC与CIK共培养对肝癌细胞杀伤活性的研究【摘要】本研究的H的是观察细胞因子诱导的杀伤细胞（CIK）与同源树突状细胞（DC）共培养后DC-CIK细胞的增殖活性、表型的变化，及其对肝癌细胞细胞毒作用的影响。釆集健康供者的外周血单个核细胞（MNC）,置于37°C,5%C02培养箱培养2小时，收集非贴壁细胞用于诱导培养CIK细胞，贴壁细胞诱导分化出成熟DC,将成熟DC和CIK细胞按1:5的比例混合培养3天，用MTT法检测DC-CIK共培养细胞杀伤SMMC-7721肝癌细胞株的活性。结果显示：DC与CIK细胞共培养后，DC-CIK细胞群的增殖活性和杀伤活性较单纯的CIK细胞更高。结论：DC与CIK共
2、培养细胞是一种增殖活性和细胞毒活性均高于CIK细胞的免疫活性细胞。【关键词】肝癌细胞KillingActivityinDCandCIKCo-cultureagainstHepatocar-cinomaCellsCHENBao-An,LIMan,SUNZai-Yang,LICui-Ping,GAOChong,SunYun-YuDepartmentofHematology,ZhongdaHospital,SoutheastUniversity,Nanjing210009,China;INanjingRedCrossBloodCentre,Nanjing210092,ChinaCIK.Abstra
3、ctThisstudywasaimedtoinvestigatetheproliferationactivitiesandphenotypechangesofDC,CIKandDC-CIK,andtheircytotoxicityagainsthepatocarcinomacellsinco-cultureofDCwithPeripheralbloodmononuclearcells(PBMNC)wereisolatedfromheathyadultdonors.AfterincubationofPBMNCfor2hours,DCswereinducedfromadherentcellsby
4、somecytokinesandCIKsweregeneratedfromnon-adherentcells.MatureDCswereharvestedafterincubationfor9days,andthenwereco-culturedwithCIKatratioof1:5for3days.ThecytotoxicityactivityagainstSMMC-7721hepatocellularcarcinomacelllinewasdetectedbyMTTassay.TheresultsshowedthatCIKcellswereabletolyseSMMC-7721hepat
5、ocellularcarcinomacellsatlowratiosofeffectortotarget.Thiseffectwassigrdficantlyenhancedbyco-culturewithDCs.ItisconeludedthatCIKcellshavehighlyticactivityagainst7721hepatocellularcarcinomacellline,whichcanbeenhancedbyco-culturewithDC.DC-CIKcellsarehighlyeffectiveimmunecells.KeywordDendriticcells;cyt
6、okineinducedkillercells;Immunetherapy近年來随着细胞免疫学和分子生物学的发展，恶性肿瘤的细胞免疫治疗己经开始在临床应用，并取得一定疗效。细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokineinducedkillercell,CIK)是一种高效、新型免疫活性细胞，是恶性肿瘤过继免疫治疗的重要手段之_。树突状细胞(dendriticcells,DC)是目前发现的功能最强的抗原呈递细胞(APC),它通过处理、呈递抗原,介导机体免疫应答。由于许多肿瘤宿主缺乏功能性DC而不能诱发抗原特异性T细胞应答，故在体外诱导功能性DC用于主动免疫治疗具冇重要的临床应用价值。本实验将成熟DC
7、和CIK细胞共培养，观察DC-CIK细胞群的增殖活性和表型变化，及其对肝癌细胞的体外杀伤作用。材料和方法主要试剂和仪器IMDM完全培养基为Gibco公司产品，10%AB灭活血清为南京红十字血液屮心产品，AIM-V无血清培养基为Gibco公司产品，淋巴细胞分离液购自上海第二制药厂，CD3单克隆抗体购自0rthoBiotech公司，IFN-alb购自上海生物制品研究所,rhlL-2购自Chiron公司,rhGM-
