细胞块免疫细胞化学在确定转移腺癌原发灶的论文

《细胞块免疫细胞化学在确定转移腺癌原发灶的论文》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、细胞块免疫细胞化学在确定转移腺癌原发灶的论文【摘要】目的探讨细胞块免疫细胞化学在诊断转移腺癌原发灶中的临床价值。方法选取手术后有病理组织学结果对照，并且淋巴结穿刺后已做细胞块的肿瘤患者150例，其中肺腺癌30例、卵巢癌30例、肠癌30例、胃癌30例、乳腺癌30例。用细针穿刺淋巴结获取标本，用血浆凝血酶的方法制成细胞块，抗体组选择ttf1、ca125、cdx2、villin、gcdfp155种抗体。结果肺腺癌的淋巴结中ttf1阳性率达90%，卵巢癌的淋巴结中ca125阳性率达90%，肠癌的淋巴结中cdx2阳性率达93%,v

2、illin阳性率达76%,胃癌的淋巴结中cdx2阳性率达50%，villin阳性率达63%，乳腺癌的淋巴结中gcdfp15阳性率达86%。结论用血浆凝血酶的方法做成的细胞块常规切片，再与免疫细胞化学相结合，不仅能确定肿瘤性质，组织学类型，解决了一些疑难病例，而且还能够对原发灶较小，比较隐匿，而以淋巴结转移为首发症状的肿瘤患者，提示确定原发灶，帮助临床制定合理治疗方案及判断预后。【关键词】细胞块免疫细胞化学转移腺癌原发灶有些肿瘤患者是以淋巴结肿大为首发症状而就诊，针吸细胞学确定恶性后，患者要做各种影像学、内窥镜检查来寻找原发灶

3、，但有时由于原发灶较小、比较隐匿，检查时不易被发现。我们采用细针穿刺淋巴结血浆凝血酶的方法做成细胞块，再与免疫细胞化学相结合，不仅能确定良恶性质，而且能提示确定原发灶。.1资料和方法1.1资料选取2005年1月～2006年10月，在我院已做手术有组织病理学结果，并且淋巴结穿刺后已做细胞块的肿瘤患者150例，其中肺腺癌30例、卵巢癌30例、肠癌30例、胃癌30例、乳腺癌30例。其中男70例，女80例，最小年龄28岁，最大年龄72岁，平均50岁。颈部淋巴结肿大20例，锁骨上淋巴结肿大62例，腋窝淋巴结肿大22例，腹股沟淋巴结肿大4

4、6例。1.2细胞块的制备方法穿刺前详细询问病史，仔细检查淋巴结位置、大小、硬度、活动度，穿刺时右手持5ml一次性注射器，刺入淋巴结，保持负压2ml不同方位穿刺，看到针芯内有乳白色或血性成分抽出即拔针，涂片2张，立即放入95％酒精湿固定30min，作he染色。剩余的标本喷到载玻片上，根据标本的多少滴上适量稀释好的凝血酶，它有促进凝固的作用，约5min待其凝固后用针头挑起放入盛有中性福尔马林固定液的塑料试管中，12h后按常规方法放入脱水盒，自动脱水机脱水，石蜡包埋，切片厚4μm。1.3免疫细胞化学的方法化学试剂一抗采用福州迈新生物

5、技术开发公司生产的ttf1、ca125、cdx2、villin、gcdfp15。检测系统采用福州迈新生物有限公司的elivision试剂盒。细胞块石蜡切片厚3～4μm，贴覆在涂有apes的胶片上，置60℃烤箱中烤片1h，梯度二甲苯脱蜡，梯度乙醇水化，蒸馏水浸泡5min，3％过氧化氢室温孵育10min以阻断内源性过氧化酶的活性，tbs液冲洗，微波炉抗原修复，自然冷却至室温。5％正常羊血清封闭后，分别加第一抗体30min，tbs冲洗3次，每次5min，加入二步法elivision试剂盒中的试剂a,室温下孵育20min，tbs冲

6、洗3次，每次5min，加入试剂盒中的试剂b，室温下孵育30min，tbs冲洗3次，每次5min。镜下控制dab显色，蒸馏水冲洗终止反应。苏木素复染，盐酸酒精分化，自来水冲洗返蓝，脱水，透明，中性树胶封固。每次均作阳性对照及tbs代替一抗作阴性对照。2结果血浆凝血酶法做成的细胞块he切片，细胞染色结构清晰，红蓝分明。细胞团呈乳头状，腺管状，菊形团状排列，有的单个散在，细胞较大，核浆比例失调，核膜厚，核仁明显，染色质粗，核有的偏位，有的细胞质内有分泌的粘液。免疫细胞化学诊断的标准：着色定位准确，呈明显棕黄色或棕褐色颗粒为阳性细胞。

7、（-）：阳性细胞≤10％；（+）：11％～25％；（++）：26％～50％；（+++）：51％～75％；（++++）：76％～100％。30例肺腺癌的淋巴结中有27例ttf1阳性表达，阳性率达90％，见图1。30例卵巢癌的淋巴结中，有28例ca125阳性表达，阳性率达93％，见图2。30例肠癌的淋巴结中有28例cdx2阳性表达，阳性率达93％，有23例villin阳性表达，阳性率达76％，见图4。30例胃癌的淋巴结中有15例cdx2阳性表达，阳性率达50％，有19例villin阳性表达，阳性率达63％，见图3。30例乳腺癌的

8、淋巴结中有26例gcdfp15阳性表达，阳性率达86％，见图5。免疫细胞化学染色结果，见表1。淋巴结位置与原发灶也有一定关系，其结果，见表2。表1各免疫细胞化学染色结果表2淋巴结位置与原发灶情况的比较3讨论恶性肿瘤严重威胁人们的生命健康，近年发病率有逐年上升的趋势。肺癌、卵