高效液相色谱法测定橘核中橙皮苷的含量的论文

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1、高效液相色谱法测定橘核中橙皮苷的含量的论文作者：汪金玉，陈康，徐小飞，张淑芬【摘要】目的建立橘核中橙皮苷含量的测定方法，为橘核的质量评价与控制提供科学依据。方法采用hplc法进行测定。色谱柱：kromasilc18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm);流动相：甲醇-36%(体积分数)乙酸-水(体积比38∶2∶60);流速：1.0ml·min-1;检测波长：285nm;柱温：25℃。结果橙皮苷在0.103～2.060μg范围内线性关系良好，r=0.9999，平均回收率为95.87%(n=6)，rsd=2.46%，3批橘核中橙皮苷含量介于0.1～0.2mg·g-1之间。结论该方法简

2、便、准确，可作为橘核中橙皮苷的定量分析和质量控制方法。【关键词】橘核;橙皮苷;含量测定;质量控制;高效液相色谱法　abstract:objectivetoestablishahplcmethodforthedeterminationofhesperidininsemensofcitrireticulatae.methodshplcedonkromasil-c18column(250mm×4.6mm,5μm)at25℃obilephaseofmethanol-36%aceticacid-l·min-1,andthedetection.resultsthelinearityofhesp

3、eridinplesg·g-1and0.2mg·g-1.conclusionthismethodissimple,accurateandsuitableforthequantitativedeterminationofhesperidininsemencitrireticulatae.　　keyencitrireticulatae;hesperidin;contentdetermination;qualitycontrol;hplc　　橘核[1]为芸香科植物橘citrusreticulutablanco及其栽培变种的种子，其味苦，平。.归肝、肾经。具有理气、散结、止痛的功效，临床可

4、用于治疗小肠疝气，睾丸肿痛，乳痈肿痛。橘核中含有橙皮苷和柠檬苦素类物质等。目前橘核的质量控制尚缺乏较全面统一的标准，虽已有关于橘核中柠檬苦素类物质含量测定的报道[2]，但柠檬苦素类物质很难得到纯度较高的单体化合物，故将其作为质控指标仍存在一定的局限性。《中国药典》2010版一部[橘核]项下描述“橘核子叶细胞显微观察可见针簇状橙皮苷结晶”，可见橙皮苷是橘核质量控制的指标之一，值得深入研究。橙皮苷具有明确的药理作用，如：维持渗透压、增强毛细血管韧性、缩短出血时间、降低胆固醇等，在临床上可用于心血管系统疾病的辅助治疗，可配制多种防止动脉硬化和心肌梗死的药物，是成药“脉通”的主要原料之一[

5、3]。此外，橙皮苷氢化后是天然甜味剂二氢查尔酮，其甜度是蔗糖的1000倍，可用于开发功能性食品[4-5]。　　本研究旨在建立橘核中橙皮苷的含量测定方法，为橘核质量的评价与控制提供科学依据，为其应用范围的进一步扩大奠定理论基础。　　1仪器与试药　　1.1仪器　　天美lc2000型高效液相色谱仪(lc2030检测器、lc2130泵、l-2200自动进样器)，t2000p色谱工作站;bp211d型电子分析天平(德国sartorius公司)，lk-400药用粉碎机(浙江城关红利数控制造厂)。　　1.2试药　　橙皮苷对照品(批号：110721-200613，供含量测定用)购自中国药品生物制品

6、检定所;橘核药材分别购自广东康美药业(1)、广州致信药业(2)及广州市采芝林连锁药店(3)，经广州中医药大学中药学院陈康教授鉴定皆为橘citrireticulataeblanco的干燥种子;流动相所用甲醇为色谱纯，水为双蒸水，其他试剂均为分析纯。　　2方法与结果　　2.1样品溶液的制备　　2.1.1对照品溶液的制备精密称取干燥至恒重的橙皮苷对照品2.06mg，用甲醇溶解并定容至10ml，制成每1ml含橙皮苷0.206mg的对照品溶液。　　2.1.2供试品溶液的制备取经粉碎机粉碎的橘核粉末约1g，精密称定，用石油醚100ml索氏提取4.5h，滤渣挥干石油醚，置圆底烧瓶中，加甲醇20m

7、l,水浴加热回流1h，静置冷却至室温，滤过，滤渣再加甲醇20ml重复提取1次，合并2次滤液，浓缩定容至10ml，经0.45μm微孔滤膜滤过，取续滤液，即得。　　2.2色谱条件与系统适用性　　色谱柱：安谱公司kromasilc18色谱柱(250mm×4.6mm，5μm);流动相：甲醇-36%(体积分数)乙酸-水(体积比38∶2∶60);流速：1.0ml·min-1;检测波长：285nm;柱温：25℃。分别精密吸取对照品、供试品溶液各10μl注入液相色谱仪中，记录色谱图，