生脉注射液对百草枯中毒大鼠肺组织核因子

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1、生脉注射液对百草枯中毒大鼠肺组织核因子【摘要】　　目的观察百草枯（pq）急性中毒大鼠所致肺损伤(ali)时核因子-кb和诱导型一氧化氮合酶(inos)的变化，探讨生脉对急性百草枯中毒所致肺损伤的保护作用。方法将50只sd大鼠随机分成5组，空白组、阴性对照组、阳性对照组、生脉低剂量组和生脉高剂量组。观察大体标本组织病理，同时测定肺组织核因子-кb和inos活性。结果与阴性对照组相比，生脉低剂量组肺组织病理显示肺淤血、肺水肿明显减轻；核因子-кb和inos也降低(p＜0.05或p＜0.01）。结论核因子-кb及inos在百草枯所致大鼠肺损伤中起重要作用，生脉注

2、射液能降低核因子-кb及inos水平，减轻百草枯中毒大鼠肺组织损伤。【关键词】生脉注射液百草枯肺损伤核因子-κb一氧化氮一氧化氮合酶　　abstract:objectivetoinvesigatetheprotectiveeffectofpulse-activatinginjectionagainstratacutelunginjury.methods50sprague-dalydividedintofiveexperimentalgroups:blankgroup,negativecontrolgroup,positivecontrolgroup,pul

3、se-activatinginjectionloacroscopicandhistopathologicalexaminationsed,andtheactivitiesoflungtissuehomogenatenk-кbandinoseasured.resultsparedportantrolesinlunginjuryofpoisonedrats.pulse-activatinginjectioncanamelioratethelunginjuryanddecreasethelevelsofnk-кbandinos.　　keypus）。　　1.2动物

4、及分组sd大鼠称重后，空白对照组腹腔注射生理盐水30mg/kg，其他组腹腔注射20%百草枯溶液30mg/kg复制百草枯急性中毒模型。动物分组如下：①空白对照组(ns)：腹腔注射生理盐水4mg/kg；②阴性对照组(pq)：腹腔注射生理盐水4mg/kg；③阳性对照组(d)：腹腔注射地塞米松0.5mg/kg；④生脉低剂量组(ldg)：腹腔注射生脉注射液0.2ml/kg；⑤生脉高剂量组(hdg)：腹腔注射生脉注射液0.4ml/kg。以上5组动物均给药2次/d，连续给药3d。　　1.3标本的收集与处理用水合氯醛麻醉大鼠后开胸暴露出气管和双肺，腹主动脉取血处死，留取血

5、清；并立即取出肺组织备用。　　1.4no测定精密称取一定量的肺组织，在持续95%(体积分数)o2-5%(体积分数)co2，37℃恒温条件下振荡孵育2h，取孵育液100μl，按试剂盒说明严格操作。　　1.5肺组织inos活性的测定速取肺组织适量，按1∶5(in离心10min，收集上清液，用考马斯亮蓝试剂盒进行蛋白定量，inos试剂盒测定提取液inos活性。　　1.6肺组织nf-κbp65的测定采用免疫组化链霉亲和素-生物素标记（lsab）法进行染色，观察nf-κbp65在大鼠肺组织中的表达和分布情况。一抗选用兔抗鼠nf-κbp65多克隆抗体，稀释度为1∶10

6、0，用sp试剂盒，按说明书依次进行操作。镜下随机选取5个高倍视野，计算5个高倍视野中阳性细胞（以胞膜/胞浆/胞核出现棕黄色着色颗粒为阳性标记）占细胞总数的百分比。　　1.7组织学检查取少许肺组织，经10%甲醛固定，石蜡包埋切片，he染色后用显微镜观察肺组织损伤情况。　　1.8统计学处理实验资料以±s表示。两组以上资料采用one-an-student-keuls检验进行统计学处理；两组资料采用student'sttest处理。p<0.05认为差异有统计学意义。　　2结果　　2.1肺组织no和inos的变化研究结果表明,pq组肺组织no浓度和inos活性

7、明显高于ns组(p＜0.01），说明百草枯可引起肺组织产生大量no，并使肺组织inos活性增高。应用生脉、地塞米松进行干预治疗后，其肺组织no浓度和inos活性较pq组明显降低(p＜0.01，p＜0.05），因此生脉可抑制肺组织产生no并抑制inos活性，而且低剂量生脉效果更佳。结果见表1及图1～2。表1肺组织中no，inos含量的变化（略）　　2.2肺组织中nf-κbp65表达的变化研究结果表明，ns组大鼠肺组织中nf-κbp65不表达或有很弱的表达，而pq组大鼠nf-κbp65有过强表达，二者比较有显著性差异（p＜0.01），说明百草枯中毒可导致肺组织

8、中nf-κbp65的过表达；与pq组相比，d组和hdg组大鼠nf-