聚肌胞对人早孕绒毛外滋养细胞tlr3表达的调节作用的论文

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1、聚肌胞对人早孕绒毛外滋养细胞TLR3表达的调节作用的论文聚肌胞对人早孕绒毛外滋养细胞tlr3表达的调节作用【关键词】tlr3;poly(i:c);tev-1细胞株;流式细胞仪;平均荧光强度;荧光阳性细胞数;免疫细胞化学【摘要】目的通过体外实验研究toll样受体3(tlr3)在人早孕绒毛外滋养细胞株tev-1的表达及聚肌胞polyi:c对tlr3mrna和蛋白的调节作用。方法体外培养tev-1细胞;用不同时间及浓度聚肌胞刺激tev-1细胞后rt-pcr和流式细胞仪检测其tlr3mrna和蛋白的表达变化;免疫细胞

2、化学sp染色法检测tlr3蛋白的定位表达。结果(1)polyi:c刺激可上调tev-1细胞株tlr3mrna的表达(p<0.01)，且与刺激时间和剂量呈正相关。(2)polyi:c刺激可上调tev-1细胞株tlr3蛋白表达的平均荧光强度(p<0.01);但荧光阳性细胞数刺激12h与刺激前比较差异无显著性(p>0.05);刺激24h、48h的荧光阳性细胞数与刺激时间和剂量呈正关(24hp<0.05;48hp<0.01)。(3)免疫细胞化学显示tlr3主要定位于tev-1细胞株的细胞

3、浆。结论tev-1细胞株tlr3的mrna及蛋白的表达与poly(i:c)刺激时间及剂量呈正相关;tlr3主要定位于tev-1细胞株的细胞浆，而细胞核及细胞膜没有观测到明显表达。.提示人早孕绒毛外滋养细胞可能通过细胞浆的tlr3参与早孕母-胎界面的免疫反应。【关键词】tlr3;poly(i:c);tev-1细胞株;流式细胞仪;平均荧光强度;荧光阳性细胞数;免疫细胞化学　[abstract]objectivetoinvestigatetheregulatoryeffectofpolyi:contheexpres

4、sionoftlr3mrnaandproteininthehumanextravilloustrophoblastcellline(tev-1)，ande.methodssemi-quantitativert-pcranalysis，floetryandimmuo-cytochemistryrnaandproteinexpressionlevelandlocationintev-icellline.results(1)theexpressionoftlr3mrnaintev-icelllinesignific

5、antlyincreasedulationtimeanddoseincrease;paretoulation(p<0.01).themeanfluorescenceintensityofthetlr3proteinintev-icelllineincreasedulationtimeanddoseincrease;paretoulation(p<0.01).(2)thenumberoffluorescencepositivecellofthetlr3proteinstimulated12hourh

6、adnostatisticssignificance(p>0.05);butitsincreasedulationtimeanddoseincreasein24and48hourintervention(24hp<0.05;48hp<0.01).(3)theimmuocytochemistryresultrevealedthattlr3proteina.hoembraneandnucleus.conclusiontlr3proteina.theincreaseofmrnaandprotein

7、expressionoftlr3intev-icelllinedependsontheincreaseofthedoseandtimeforpolyi:c’sstimulation.　　[keyetry;averagefluorescenceintensity;thenumberoffluorescencepositivecell　　正常妊娠时母-胎界面存在着很强的免疫反应，其主要作用是促进胚胎植入和调节胎盘的发育，使母体对半异体来源的胎儿、胎盘产生耐受;同时，维持宿主防御反应，从而阻止病原微生物对机体组织和

8、妊娠的破坏。母胎界面处的滋养细胞、免疫活性细胞及细胞因子，构成了母-胎界面的免疫微环境，对于妊娠的建立、维持、胎儿的生长发育以及分娩发动起着重要作用[1]。而妊娠病理(如:反复自发性流产、早产、子痫、胎膜早破、iugr等)则与母-胎界面的免疫微环境的改变有关[2]。因此，母-胎界面处细胞生物学和分子免疫学的研究已成为医学研究的热点之一。　　天然免疫性细胞是可以通过对病原体表达的病原体相关分子模式识别