浅论angⅱ对腹膜间皮细胞ros和nadph氧化酶亚基p47phox表达的影响及黄芪的干预作用的论文

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1、浅论AngⅡ对腹膜间皮细胞ROS和NADPH氧化酶亚基p47phox表达的影响及黄芪的干预作用的论文【摘要】目的探讨angⅱ对腹膜间皮细胞ros和nadph氧化酶亚基p47phox表达的影响及二代腹膜间皮细胞经黄芪注射液(agi)预处理后的干预作用。方法体外培养sd大鼠原代腹膜间皮细胞至2代，静止24h后，随机分为：正常对照组(a组)，angⅱ(10-7mol/l)组(b组)，angⅱ+agi(2g/ml)组(c组)，angⅱ+agi(1g/ml)组(d组)。用荧光染料(dcf)及激光共聚焦显微镜检测细胞内活性氧(ros)。rt-pcr检测nadph氧化酶亚基p4

2、7phox的表达。in后，ros的表达较对照组显著上升(p<0.05)。agi可显著抑制angⅱ刺激后ros的产生,且agi对ros的抑制程度与agi的浓度呈正相关，b组、c组、d组三组比较后差异显著(p<0.05);②大鼠腹膜间皮细胞经angⅱ刺激后，nadph氧化酶亚基p47phoxmrna和蛋白的表达均上升，agi可抑制angⅱ诱导的p47phoxmrna的表达上调，c、d两组分别与b组比较后差异显著(p<0.05)。结论angⅱ可诱导大鼠腹膜间皮细胞产生的ros增加、nadph氧化酶亚基p47phox表达上调;agi可抑制nadph氧化酶

3、的表达和活性及ros的产生，从而为agi防治腹膜纤维化提供了理论依据。.cOm【关键词】腹膜间皮细胞;血管紧张素ⅱ;活性氧;nadph氧化酶;黄芪　abstract:objectivetoexploretheeffectsofangiotensinⅱonthereactiveoxygenspeciesofperitoneummesothelialcellsandexpressionofnicotinamide-adeninedinucleotidephosphate(nadph)oxidasesubunitp47phoxasmesothelialcells.met

4、hodsprimaryratperitoneummesothelialcellslyassignedtocontrolgroup(groupa),angⅱ(10-7mol/l)group(groupb),angⅱ+agi(2g/ml)group(groupc),andangⅱ+agi(1g/ml)group(groupd).thedcf-sensitivecellularroseasuredbyfluorometricassayandconfocalmicroscopy.rt-pcrployedtodetectthemrnaexpressionofnadphoxi

5、dasesubunitp47phox,andp47phoxproteinexpressioninedbyulationfor20minutes,rosexpressionincreasedsignificantlyparedeachother(p<0.05).②angⅱstimulatednadphoxidasesubunitp47phoxmrnaandproteinoverexpressions,andagiinhibitedtheup-regulationofp47phoxmrnaoverexpression.groupscanddmesothelial

6、intracellularrosandup-overexpressionofnadphoxidaseandcellularrosgeneration,mesothelialcell;angiotensinⅱ;reactionoxygenspecies;nicotinamide-adeninedinucleotidephosphate(nadph)oxidase;astragalus　　腹膜纤维化是长期腹膜透析(peritoneumdialysis,pd)患者的重要并发症之一，最终导致腹膜结构异常、丧失超滤功能而退出腹膜透析。高糖腹膜透析液可引起腹膜发生氧化应激反应

7、，导致腹膜结构和功能异常。近年研究证实，血管紧张素ⅱ(angiotensinⅱ,angⅱ)参与了腹膜间皮细胞的转分化和细胞外基质的积聚，与腹膜纤维化的发生发展密切相关[1-2];烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(nicotinamide-adeninedinucleotidephosphate,nadph)氧化酶作为活性氧(reactiveoxygenspecies,ros)的调控酶，其胞浆亚基p47phox在多种组织的氧化应激反应中起着枢纽性作用[3-4]。调节nadph氧化酶亚基p47phox的表达及活性成为改善氧化应激状态、防治腹膜纤维化的重要切入点。色谱指纹图谱证

8、实黄芪注射