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1、桂枝甘草汤方药半仿生提取法药材组合方式的优选的论文【摘要】目的优选桂枝甘草汤方药成分提取时药材的最佳组合方式。方法将方药分成混煎组和桂枝、甘草单煎混合组,用半仿生提取法提取,提取液作甘草次酸、肉桂酸、总黄酮、挥发油、干浸膏的含量测定及50%乙醇精制液的hplc指纹图谱比较。结果除干浸膏2种组合提取液含量相近外,其余4个指标成分含量混煎液均明显高于单煎混合液；2种组合提取液的hplc指纹图谱无明显差异；hplc梯度洗脱总积分面积及主要特征峰峰面积：混煎液＞单煎混合液。结论桂枝甘草汤方药成分提取时以桂枝与甘草混煎为佳。【关键词】桂枝甘草汤；半仿生提取法；甘草次酸
2、；肉桂酸；黄酮化合物；挥发油；指纹图谱abstract：objectivetooptimizethebestingredientsbinationofguizhigancaodecoction.methodtheprescriptioni-bionicextraction.thecontentsofglycyrrhetinicacid,cinnamicacid,totalflavones,volatileoilanddryextractintheeachextractined,andhplcfingerprintoftherefinedby50%ethano
3、lilarcontentofdryextractintixedextractissignificantlyhigherthanindividualextraction.taincharacteristicpeakareainmixedextractixed. keyi-bionicextraction；glycyrrhetinicacid；cinnamicacid；totalflavones；volatileoil；hplcfingerprint桂枝甘草汤出自汉代张仲景的《伤寒论》,由桂枝、炙甘草组成,具有补心助阳、生阳化气、补阳扶中的功效。.临床用于心
4、率失常具有较好效果。有研究表明,桂枝甘草汤对环磷酰胺诱发的姐妹染色体互换及微核升高具有较强的抑制作用[1-2]。但目前桂枝甘草汤的应用仍以汤剂为主,方药的提取多采用水提法,存在挥发性成分易损失、易霉变、服用不便等缺点。本试验在用均匀设计优选出桂枝甘草汤半仿生提取法(简称sbe法)工艺条件的基础上,将方中药材组合成2组,用优选出的sbe法工艺条件提取,提取液作甘草次酸、肉桂酸、总黄酮、挥发油、干浸膏的含量测定及50%乙醇精制液的hplc指纹图谱比较,优选出桂枝甘草汤方药提取时药材的最佳组合方式。 1仪器与试药lc-10a型高效液相色谱仪(日本岛津公司)；75
5、4紫外可见分光光度计(上海精密科学仪器有限公司)；phs-3c型精密ph计(上海雷磁仪器厂)；fa1004型电子分析天平(上海第二分析仪器厂)；lxv-ⅱ型离心沉淀机(上海第二分析仪器厂)；kq-250e型医用超声清洗器(昆山市超声仪器有限公司)；色谱柱：phenomenexods3(5μm,4.6mm×150mm)；spd-10avp紫外检测器；re-52aa型旋转蒸发器(上海亚荣生化仪器厂)。 药材经鉴定,桂枝为樟科植物肉桂cinnamomumcassiapresl的干燥嫩枝,甘草为豆科植物甘草glycyrrhizauralensisfisch.的干燥
6、根及根茎。炙甘草：取炼蜜,加适量开水稀释后,淋入净甘草片中拌匀,闷润,置炒制容器内,用文火加热,炒至老黄色,不粘手时取出,放凉(每100kg甘草用炼蜜25kg)。 甘草次酸、肉桂酸、柚皮苷对照品(中国药品生物制品检定所提供,批号分别为723-200109、710-200011、722-200107)；甲醇为色谱纯；水为三蒸水；其余试剂均为分析纯。 2方法与结果 2.1药材的组合方式将桂枝、甘草排列组合成2组,即单煎混合组和混煎组。混煎组为桂枝、甘草合煎；单煎混合组为桂枝、甘草分别单煎后合并2种浓缩液。 2.2提取液的制备将处方药材分别粉碎,过10～2
7、0目筛,按处方比例(桂枝∶甘草＝2∶1)分别称取桂枝粗粉80g、炙甘草粗粉40g,按“2.1“项下组合方式,用sbe法分别提取3次(双提法：第1次用水用0.1mol/lhcl调至ph为2.04,第2、3次用水用0.1mol/lnaoh调至ph为7.25、8.51；加水量依次为药材重量的10、8、8倍；煎煮时间依次为190、95、45min；双提法提取的挥发油单独存放),分别滤过,离心,合并上清液,水浴浓缩至400ml。同法制备甘草、桂枝单煎液,即得(每1ml相当于原药材0.3g)。 2.3供试液的制备精取提取液各10ml,加水35ml,缓缓加入盐酸4ml,
8、静置30min,待气泡消失后,再加盐酸1ml、氯仿3
