平喘合剂抑制哮喘模型大鼠气道炎症的实验研究-

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1、平喘合剂抑制哮喘模型大鼠气道炎症的实验研究*关键词：平喘合剂【摘要】目的通过动物实验，探讨平喘合剂治疗儿童哮喘的作用机制。方法40只大鼠随机分为正常组、模型组、博利康尼组、痰喘丸组、平喘合剂组，分别测定各组大鼠血浆和肺泡灌洗液（BALF）中IL-2、IL-4、TNF-α、ET-1含量及肺组织嗜酸粒细胞（EOS）凋亡情况。结果平喘合剂具有良好的解痉平喘、抗炎作用。结论平喘合剂治疗儿童哮喘的作用机制与抑制气道炎症等机制有关。【关键词】平喘合剂；儿童哮喘；实验研究Experimentalstudiesonjuv

2、enilebronchialasthmatreatedixture【Abstract】ObjectiveThroughexperimentalstudies，toresearchthecuremechanismsofpingchuanmixturetojuvenilebronchialasthma.Methods40maleratslydividedintonormalgroup，modelgroup，bricanylgroup，TanChuanixturegroup，thentomeasurethele

3、velofIL-2，IL-4，TNF，ET-1inplasmaandBALFandtheapoptosisofEOSinlungtissue.ResultsPingchuanmixtureexertgoodeffectsonspasm，asthmaandinflammation.ConclusionThemechanismofpingchuanmixtureassociatedmation.【Keyixture；childasthma；experimentalstudy支气管哮喘是一种以肥大细胞反应、嗜酸

4、粒细胞（EOS）浸润为主的气道慢性炎症性疾病，严重威胁人类特别是儿童的身体健康。近年来，全球发病率和死亡率均呈上升趋势，为探索其发病机制，寻求其有效的防治药物已成为当前的研究热点。平喘合剂是我们多年来治疗儿童哮喘发作期的有效方剂，为探讨其作用机制，我们进行了平喘合剂治疗哮喘的实验研究，现总结报告如下。1材料与方法1.1动物选择健康雄性l的浓度，250ml/瓶。1.2.2博利康尼用生理盐水配成0.083mg/ml的浓度。1.2.3京制咳嗽痰喘丸用生理盐水配成0.14g/ml的浓度。1.3药品与试剂液体石蜡，

5、天津市新精细化工开发中心（批号：980908）。羊毛脂，中国嘉定华亭羊毛脂厂（批号：990403）。冻干卡介苗制剂60mg/支，兰州生物制品研究所（批号：20010610）。卵清蛋白（OA）冻干粉10g/支，北京鼎国生物技术发展中心，Sigma分装（批号：20011222）。TNF-α、IL-2、IL-4试剂盒（ELISA），深圳晶美公司。ET-1试剂盒（放射免疫），购于北京东亚放免所。1.4动物造模与分组取体重为（200±10)g的雄性l，水浴混匀，装入小磨口瓶内，高压（0.14mPa）蒸汽灭菌20mi

6、n，冷却后倒入无菌研钵中，按每毫升加入50mg卵清蛋白、10mg卡介苗，慢慢研磨，制成乳白色混悬液作为抗原液备用。取1ml抗原液于大鼠背部选4个点进行皮下注射，正常组则以等量生理盐水代替。抗原接种后休息5天，从第6天开始卵清蛋白雾化吸入激发，至引喘成功。1.5实验方法1.5.1给药方法将造模成功后的大鼠进行药物灌胃，药物用量按陈奇提供的常用动物与人的药量换算公式计算（D2=D1·R2/R1）［3］。C、D、E组均每次给予相应的药物（0.5ml/100g体重），每日2次，A、B组以等量的生理盐水代替，共喂养

7、7天。1.5.2取材激发试验后24h用0.4%戊巴比妥钠麻醉（1ml/100g体重）大鼠，腹主动脉取血，EDTA-2Na（乙二胺四乙酸二钠）抗凝，以3000r/min离心5min，取血浆代用。取血后处死动物，结扎左主支气管，用气管套管插在主支气管上，结扎固定，行右支气管肺泡灌洗。针管内抽6ml生理盐水，缓慢推进，保留20s，然后缓慢抽回，共操作3次，收集肺泡灌洗液（BALF）4ml。以3000r/min离心5min，取上清液待用。1.6观察项目1.6.1引喘潜伏期实验第13天将致敏大鼠放在玻璃钟罩内，用1

8、%的卵清蛋白生理盐水以5ml/min的流速进行喷雾，每次喷20min，观察至喷雾停止后10min，记录大鼠出现喘息的情况（表现为四肢挠抓，躁动不安，伴有呼吸加速，腹部内陷起伏等呼吸困难症状）。正常组以生理盐水代替。1.6.2血浆及BALF中TNF-α、IL-2、IL-4的含量测定取抗凝血以3000r/min离心5min，取血浆待用。采用ELISA法测血浆及BALF中TNF-α、IL-2、IL-4的含量。（具体步骤按试剂说明进行