普瑞巴林对癫痫模型大鼠神经元的保护作用及其机制

《普瑞巴林对癫痫模型大鼠神经元的保护作用及其机制》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。

1、普瑞巴林对癫痫模型大鼠神经元的保护作用及其机制【摘要】目的探讨γ-氨基丁酸(γ-aminobutyricacid,GABA)受体阻滞剂普瑞巴林(Pregabalin)对戊四唑(Pentylentetrazol,PTZ)诱导的癫痫模型大鼠神经元损伤的保护作用及其机制。方法健康SD大鼠38只，随机分为5组，对照组、癫痫组和Pregabalin3个剂量组(20、40、80mg/kg)。观察大鼠腹腔注射PTZ前后癫痫发作的情况，同时记录皮层脑电图(electrocoticogram,ECoG)。应用APK及其上游MKK3，下游c-MYC相关蛋白的表达。结果癫痫组给PTZ后均出现癫痫发作，普瑞巴林组发

2、作程度明显减轻。ECoG潜伏期延长，痫样放电一小时持续时间缩短。同时，与对照组相比，癫痫组和Pregabalin3个剂量组大鼠CA1区蛋白表达强度升高(P<0.05);与癫痫组相比，Pregabalin3个剂量组大鼠CA1区蛋白表达强度降低(P<0.05)。结论Pregabalin对PTZ诱导的癫痫大鼠的发作有明显的对抗作用，癫痫大鼠海马具有保护作用，其作用与P38MAPK通路相关蛋白的表达相关。【关键词】癫痫;普瑞巴林;痫性发作;皮层脑电图PregabalinsInfluenceonExperimentRatsofCausedEpilepsyZHUJinli1，LIUXueo

3、del.Methods38healthySDratslydividedinto5groups,controlgroup,epilepsygroupand3differentdosePregabalingroup(20,40,80mg/kg).ObserveseizuressituationofRatsbeforeandafterintraperitonealinjection,,ECoG).ToanalysetheexpressionofP38MAPKhippocampusareaCA1,P38MAPKandupstreamMKK3,doofMYC-relatedproteinuseingA

4、PK信号及其上、下游通路的作用。　　1材料和方法　　1.1试剂及仪器　　Pregabalin：武汉远城科技发展有限公司，PTZ：美国Sigma公司生产，P38MAKP抗体、c-Myc抗体:武汉博士德生物工程有限公司;MKK3抗体：天津赛尔生物技术有限公司;大鼠脑立体定位仪：VDT-1西北光学仪器厂。　　1.2方法　　健康Sprague-Dam﹑正中缝旁开3.0mm﹑硬膜下0.5mm，即左右顶叶皮质，用牙科水泥固定两个螺丝，其尾端分别引出一不锈钢电极,选择前额正中为0电极，分别与前述两电极相连，组成单导联，待测皮质脑电图(ECoG)。将动物随机分为5组，即对照组、癫痫组和Pregabalin3

5、个剂量组(20、40、80mg/kg)。均固定电极，第二天对照组腹腔注射生理盐水20min后腹腔注射PTZ(65mg/kg)，癫痫组腹腔注射PTZ(65mg/kg)和Pregabalin3个剂量组(按三个不同剂量)分别腹腔注射Pregabalin20min后腹腔注射PTZ(65mg/kg)。观察大鼠癫痫发作的情况及EcoG的改变。用Pclab生物信号处理系统进行采集，低速25mm/s，当出现频发棘波或尖波，棘慢、尖慢复合波，阵发性高波幅时，判定为脑电图癫痫样放电活动，观察癫痫样放电的潜伏期，并分别连续记录腹腔注射PTZ后1小时内累积癫痫样放电活动持续时间。癫痫发作分级参照acine分级标准[

6、2]。　　1.3APK表达　　急性癫痫大鼠模型制备后2小时，每组随机抽取半数大鼠，取出海马-70℃冰存，经转膜—洗膜—封闭—一抗反应—二抗反应—洗膜显色后用发光法进行X光胶片曝光。然后进行条带扫描和分析P38MAPK及其上游MKK3，下游c-MYC相关蛋白的表达。　　1.4统计学方法　　实验结果计量资料均用±s表示，统计分析采用F检验及q检验。P<0.05作为差异显著性指标，P<0.01为差异极显著性指标。　　2结果　　2.1Pregabalin对PTZ致痫大鼠的痫性行为的影响　　癫痫组6只大鼠均出现痫性发作，其发作程度均为5级;Pregabalin20mg/kg组，8只大鼠均出

7、现癫痫发作，但程度较对照组明显减轻，其中2只3级发作，3只2级发作，3只1级发作;Pregabalin40mg/kg组，8只大鼠1只未发作，4只1级发作，3只2级发作;Pregabalin80mg/kg组，6只1级发作，2只2级发作。　　2.2Pregabalin对PTZ致痫大鼠的ECoG的影响　　正常大鼠ECoG均以α、β波为主要表现，无明显节律性，波幅40～70μV，癫痫组观察的6只大鼠均在给药后很快出现