结缔组织生长因子单链抗体对博莱霉素诱导的小鼠肺纤维化的影响

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1、结缔组织生长因子单链抗体对博莱霉素诱导的小鼠肺纤维化的影响：苟丽霞，吴国球，范晓波，刘朝朝，吴宏斌【摘要】目的：研究结缔组织生长因子(CTGF)单链抗体(ScFv)对博莱霉素诱导的小鼠肺纤维化模型各阶段的支气管肺泡灌洗液(BALF)中炎症细胞数及纤维化程度的影响。方法：昆明小鼠36只，随机分为对照组、模型组和ScFv组，每组12只;后2组麻醉后气管内滴入博莱霉素制备模型，滴药后第2天开始尾静脉分别注入生理盐水或ScFv(4mg·kg-1)，3次·周-1，对照组给予等量的生理盐水;气管内滴药后第7、14、28天分3批处死小鼠，收集左肺BALF，

2、进行炎症细胞计数和分类;肺组织HE染色后观察肺纤维化程度。结果：(1)第7天模型组有明显的肺泡炎，ScFv组小鼠肺泡炎症病变轻微;第28天模型组出现肺纤维化，ScFv组纤维化程度明显低于模型组(P<0.05);(2)第7、14天模型组小鼠BALF中细胞总数及巨噬细胞、淋巴细胞、中性粒细胞均明显高于对照组(P<0.05)，ScFv组明显低于模型组(P<0.05)。结论：CTGFScFv可减少肺纤维化模型BALF中的炎症细胞，减缓肺纤维化的发生发展。【关键词】结缔组织生长因子单链抗体;肺纤维化;支气管肺泡灌洗液;炎症细胞;小鼠　

3、　[Abstract]Objective:Toinvestigatetheeffectsofthesinglechainvariablefragmentofantibody(ScFv)againstconnectivetissuegromatorycellsinbronchoalreolarlavagefluid(BALF)andfibrosisdgreeofpulmonaryfibrosismodelinducedbybleomycin.Methods:ThirtysixmaleKunmingmicelydividedintothreeg

4、roups:thecontrolgroup,themodelgroupandtheScFvgroup.Thelattertycinviatrachea(5mg·kg-1)andthecontrolinjectedg·kg-1),andtheothersonarytissueiceineachgroupinistrationtocollectsamples，onarylobeicroscope.Results:(1)Apparentalveolitisappearedinthemodelgroup,uchslightintheScFvgroup

5、atthe7thday.Atthe28thday,bothofthegroupsappearedpulmonaryfibrosis,butthefibrosisofScFvgroupseemedinaearlierstage(P<0.05).(2)Atthe7thand14thday,thenumberofcellandthepropotionofneutrophilsinBALFinthemodelgroupberofcellsandthepropotionofneutrophilsinBALFintheScFvgroupodelgr

6、oup(P<0.05).Conclusion:ScFvcandecreasethenumberofinflammatorycellsinBALFofthepulmonaryfibrosismodelinducedbybleomycin,entofantibodyagainstconnectivetissuegroonaryfibrosis;bronchoalveolarlavagefluid;inflammatorycells;mice　　肺纤维化是肺损伤后常见的反应和并发症，尽管致病因素不同，但其主要的病理改变为弥漫性肺泡炎症、肺成纤

7、维细胞灶的形成以及细胞外基质的反复修复和过度沉积[1]。肺纤维化常以呼吸功能永久丧失为最终结局，目前尚缺乏有效防治手段[2]。肺纤维化的早期为肺泡炎阶段，大量的炎症细胞和肺组织细胞分泌多种细胞因子和酶，构成一个相互交错的网络，参与肺纤维化的形成，逐渐发展为弥漫性的肺纤维化，转化生长因子(transforminggrog·支-1)，日本化药株式会社生产;CTGFScFv，本实验室利用基因工程技术纯化制备。　　1.2实验方法　　1.2.1动物分组及肺纤维化动物模型的建立36只小鼠随机分为对照组、模型组和ScFv组,每组12只。小鼠称量体质量后，1

8、0%乌拉坦0.2～0.3ml腹腔注射麻醉，仰卧固定在实验台上，颈部去毛后乙醇消毒，切开皮肤，钝性分离，逐层暴露气管，将微量注射器针头经两气管软骨环之间朝向心端刺入气