脑心通对人thp1单核源性巨噬细胞清道夫受体表达的影响

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1、脑心通对人THP1单核源性巨噬细胞清道夫受体表达的影响：刘倩，王东琦，雷新军，崔长琮，李红兵，刘胜强【摘要】目的以阿托伐他汀为标准对照，研究中成药脑心通对人THP1单核源性巨噬细胞清道夫受体CD36和SRA表达的影响。方法人THP1单核源性巨噬细胞与50mg/LoxLDL共培养0、8、16、24h，流式细胞术检测各时间点细胞表面清道夫受体CD36和SRA的表达。不同浓度脑心通(0.125、0.25、0.5、1g/L)和1μmol/L阿托伐他汀分别干预THP1单核源性巨噬细胞12h后换液

2、，分别加入上述浓度药液及50mg/LoxLDL孵育24h，检测CD36和SRA的表达量，统计分析不同浓度脑心通及1μmol/L阿托伐他汀对CD36和SRA表达的影响。结果oxLDL明显促进人THP1单核源性巨噬细胞CD36和SRA的表达；脑心通呈剂量依赖性抑制CD36和SRA的表达，1g/L脑心通作用最为明显(分别降低22.3%、25.0%，P<0.05)；1μmol/L阿托伐他汀显著抑制两者表达(分别下降63.3%、70.5%，P<0.05)。结论中成药脑心通有轻度抑制TH

3、P1单核源性巨噬细胞清道夫受体表达的作用，此作用弱于阿托伐他汀。【关键词】THP1巨噬细胞；脑心通；CD36；SRATHP1ABSTRACT:ObjectiveToinvestigatetheeffectofChinesepreparedmedicineNaoxintongonscavengerreceptorsCD36andSRAexpressionofhumanTHP1monocytederivedmacrophages.MethodsHumanTHP1monocytederi

4、vedmacrophagesg/LoxLDLfor0h,8h,16hand24h.CellsurfacescavengerreceptorsCD36andSRAexpressionetry.HumanTHP1monocytederivedmacrophagesol/LAtorvastatinfor12hours.Afterthemediumentioneddrugsand50mg/LoxLDLotedCD36andSRAexpressionobviously.Naoxintonginhib

5、itedCD36andSRAexpressionslightlyinadosedependentmanner.Theeffectof1g/LNaoxintonggroupostsignificant(respectivelydecreasedby22.3%and25%,P<0.05).1μmol/LAtorvastatininhibitedtheabovetedicineNaoxintonginhibitsthescavengerreceptorexpressionofTHP1mono

6、cytederivedmacrophagesslightly,andthiseffectisonocytederivedmacrophages;Naoxintong;CD36;scavengerreceptorA(SRA)　现今认为动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)是一种慢性增生性炎症反应过程[1]，是炎细胞(主要是单核巨噬细胞)吞噬“入侵”动脉壁的“病原性”脂蛋白即氧化低密度脂蛋白(oxidizedlo2培养瓶和直径60mm的培养皿(Corning)；oxLDL(蛋白

7、含量：1g/L，中国医学科学院基础所生化室)；THP1单核细胞株(中科院上海细胞所)；RPMI1640培养基(Gibco)；胎牛血清(FCS，杭州四季青)；佛波酯(PMA，Sigma)；牛血清白蛋白(BSA，上海长征)；阿托伐他汀(辉瑞制药)；脑心通(步长集团，参照日本YAMASHIKI等的方法置备粗提液[7])；FITCantihumanCD36抗体及PEantihumanSRA抗体(eBioscience)。1.2THP1单核源性巨噬细胞的培养与分组THP1单核细胞在含100

8、mL/L胎牛血清的RPMI1640培养液中，于37℃、50mL/LCO2条件下静置培养。取对数生长期细胞，密度调至1.0×109/L，加入终质量浓度为100μg/L的PMA，无血清孵育24h，待悬浮细胞转变为贴壁、有伪足的巨噬细胞后，弃上清，预温PBS轻洗2次，按照以下分组进行实验：①oxLDL组：50mg/LoxLDL与细胞共培养不同时间(0、8、16、24h)；②脑心通组：0.125g/L、0.25g/L、0.5g/L、1g/L的脑心通分别干预细胞12h后，弃上清，分别加入上