β肾上腺素能受体介导thp-1单核细胞趋化因子受体2表达及迁移的影响

《β肾上腺素能受体介导thp-1单核细胞趋化因子受体2表达及迁移的影响》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、分类号R392密级公开UDC硕士学位论文β肾上腺素能受体介导THP-1单核细胞趋化因子受体2表达及迁移的影响学位申请人：郭院林学科专业：免疫学指导教师：周敬群教授二○一二年五月ADissertationSubmittedinPartialFulfillmentoftheRequirementsfortheDegreeofMasterofMedicineEffectsmediatedbyβ-ARonCCR2expressionandmigrationofTHP-1cellsGraduateStudent:GuoYuanlinMajor:ImmunologySupervis

2、or:Prof.ZhouJingqunChinaThreeGorgesUniversityYichang,443002,P.R.ChinaMay,2012三峡大学硕士学位论文三峡大学学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果，除文中已经注明引用的内容外，本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体均已在文中以明确方式标明，本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。学位论文作者签名：日期：三峡大学研究生知识产权承诺书本人承认：我作为三峡大学硕士研究生在校学习期间，在导

3、师指导下，依据研究工作所作学位论文的知识产权全部权归三峡大学所有。本人承诺：我有义务维护三峡大学的知识产权，凡是以我本人学位论文内的全部或部分研究成果，或实验数据为基础所形成的研究论文及成果，无论是以何种形式刊发学术论文、进行成果鉴定或申报奖励，均以三峡大学为第一作者单位或完成单位，并事先征得导师或学校相关部门的同意。我愿承担因违背上述承诺而引起的一切法津和经济后果。学位论文作者签名：日期：I三峡大学硕士学位论文内容摘要目的：β肾上腺素能受体阻滞剂对慢性精神应激所诱发的冠心病疗效显著，但机制不明。外周循环血液中淋巴细胞膜上含有高密度β2肾上腺能受体（β-AR），它是交感

4、神经递质对免疫系统进行调节的分子基础。单核-巨噬细胞在动脉粥样硬化的发生发展过程中起着重要的作用。研究发现冠心病不稳定性斑块内有大量巨噬细胞浸润，其膜上也含有高密度的β2-AR。慢性精神应激时释放的儿茶酚胺类激素是否与β-AR结合，由此调节单核-巨噬细胞功能和影响动脉粥样斑块的性质，国内外未见类似研究。本项目以单核-巨噬细胞β-AR为研究对象，在细胞水平上，探讨β-AR活性对人单核细胞（THP-1）趋化因子受体2（CChemokineReceptor2，CCR2）表达及迁移的影响。方法：(1)体外培养THP-1细胞，实验分为对照组、异丙肾上腺素组（0.1μmol/L、1

5、μmol/L、10μmol/L、50μmol/L）、美托洛尔组（0.1μmol/L、1μmol/L、10μmol/L、50μmol/L、）、普萘洛尔组（0.01μmol/L、0.1μmol/L、1μmol/L、10μmol/L）。(2)，不通浓度的异丙肾上腺素与THP-1细胞作用1小时后，与50mg/Lox-LDL共孵育24小时，采用Westernblotting检测THP-1细胞CCR2蛋白的表达，Transwell小室检测THP-1细胞的迁移能力。（3）50μmol/L的异丙肾上腺素与THP-1细胞预孵育1h和不同浓度的美托洛尔预孵育1h后，与50mg/Lox-LD

6、L共孵育24小时，采用Westernblotting检测THP-1细胞CCR2蛋白的表达，Transwell小室检测THP-1细胞的迁移能力。（4）50μmol/L的异丙肾上腺素与THP-1细胞预孵育1h和不同浓度的普萘洛尔预孵育1h后，与50mg/Lox-LDL共孵育24小时，采用Westernblotting检测THP-1细胞CCR2蛋白的表达，Transwell小室检测THP-1细胞的迁移能力。结果：（1）不同浓度的异丙肾上腺素作用THP-1细胞1h小时，与50mg/Lox-LDL共孵育24小时后，结果显示，1μmol/L、10μmol/L及50μmol/L异丙肾

7、上腺素处理后，细胞CCR2蛋白水平明显上调（P<0.05），细胞迁移能力明显增强（P<0.05），并呈浓度依赖性；（2）非选择性β肾上腺素能受体阻滞剂普萘洛尔与受试细胞孵育24小时后能明显阻滞异丙肾上腺素对CCR2蛋白表达以及细胞迁移能力的影响，呈剂量依赖性（P<0.05）。而高浓度的美托洛尔（10μmol/L、50μmol/L）也能拮抗异丙肾上腺素的作用（P<0.05）。结论：（1）通过β-AR介导，异丙肾上腺素能够上调ox-LDL诱导的THP-1细胞CCR2蛋白的表达，促进细胞的迁移。（2）高浓度的美托洛尔和低浓度的普萘洛尔可以下调o