hbv持续感染患者调节性t细胞检测及其意义

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1、HBV持续感染患者调节性T细胞检测及其意义：赵爽孙均周培培徐娟颜学兵【摘要】目的研究调节性T细胞(Treg)在慢性乙型肝炎(CHB)发病机制中的作用，为寻找治疗CHB的新方法奠定基础。方法用流式细胞仪检测了75例CHB患者和30例慢性乙型肝炎病毒(HBV)携带者外周血中Treg含量，CHB患者中HBeAg阳性患者39例，HBeAg阴性患者36例，慢性HBV携带者中HBeAg阴性和HBeAg阳性患者各15例。并对其中23例CHB患者服用核苷(酸)类似物前后外周血Treg含量进行检测。结果CHB患者外

2、周血Treg含量明显高于慢性HBV携带者(P<0.05)，而CHB和慢性HBV携带者中HBeAg阴性和HBeAg阳性患者外周血Treg含量均无明显差异(P>0.05)。经核苷(酸)类似物治疗12周后，CHB患者外周血Treg含量较治疗前有所降低(P<0.05)。结论Treg在HBV致病机制中起一定的作用，体外调控Treg含量和功能可能为治疗HBV感染提供一个新的途径。【关键词】慢性乙型肝炎;慢性HBV携带者;调节性T细胞　Abstract:ObjectiveToinvestiga

3、tetheroleofTregulatorycell(Treg)inthepathogenesisofchronichepatitisB(CHB)andlaythebasisforneinationofTreglevelsintheperipheralbloodbyfloetry,ofthereinedbeforeandafteradministrationofnucleos(t)ideanaloguesin23CHBpatients.ResultsTheTreglevelsintheperiph

4、eralbloodinCHBpatientsportantroleinthepathogenesisofCHB.ExternalregulationofthelevelandfunctionofTregmightprovideaneeansforthetherapyofHBVinfections.　　KeyRNA的表达水平来判定CD4+CD25+Treg的含量。Foxp3虽被认为是Treg的特异性标志，但其属于胞内蛋白，检测时需细胞破膜处理，可能会影响检测的结果和下游的实验，故检测结果并不稳定。我

5、们的实验用流式细胞仪检测Treg表面双标志物CD4+/CD25+的方法，研究慢性乙型肝炎(chroinchepatitisB，CHB)患者和慢性HBV携带者外周血Treg含量的差异以及核苷(酸)类似物治疗前后Treg含量的差异，以研究Treg在HBV致病机制中的作用，为临床治疗CHB提供理论依据。　　1资料和方法　　1.1研究对象和分组75例CHB患者和30例慢性HBV携带者来自2006年12月—2008年6月徐州医学院附属医院感染性疾病科住院和门诊患者，其中男性65例，女性40例，年龄18～60

6、岁，平均年龄(41.8±4.6)岁。正常对照组(NC)20例来自徐州医学院附属医院健康体检中心，既往身体健康，无其他基础病，其中男性11例，女性9例，平均年龄(40±4.2)岁。CHB组中HBeAg阳性患者39例，HBeAg阴性患者36例，慢性HBV携带者中HBeAg阴性和HBeAg阳性患者各15例。CHB患者中有27例服用核苷(酸)类似物治疗(其中4例患者在治疗12周前失访，10例服用恩替卡韦，13例服用阿德福韦酯)。CHB诊断依据2000年西安全国病毒性肝炎会议制定的诊断标准，排除甲型肝炎、丙

7、型肝炎、戊型肝炎、药物性和酒精性肝病、自身免疫性肝病等。　　1.2标本的收集与处理所有患者采外周血1ml用EDTA抗凝，直接用流式细胞仪检测CD4、CD25。　　1.3流式细胞仪检测CD4、CD25抗体购于杭州联科公司。将相应抗体分别加入2只空白离心管中，分别为阳性管和阴性管，每管分别加入抗凝外周血100μl，充分混匀，4℃避光20min。在全血样本中加入溶血剂1ml，混匀放置10min,全血样本PBS洗涤3次，培养管洗1次，沉淀用200μlPBS悬浮，上流式细胞仪检测。　　1.4统计学处理SPS

8、S11.0统计软件对数据进行分析，计量资料两组间比较采用t检验。P<0.05认为差异有统计学意义。　　2结果　　2.1CHB患者和慢性HBV携带者外周血Treg含量比较CHB组外周血Treg含量明显高于慢性HBV携带者(P<0.05)，见表1。　　表1CHB患者和慢性HBV携带者Treg含量比较　　2.2CHB患者中HBeAg阳性与阴性患者外周血Treg含量比较CHB患者中HBeAg阳性与阴性患者外周血Treg含量比较无明显差异(P>0.05)，见表2。表2Tre