koh涂片镜检法诊断真菌性角膜炎的意义

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1、KOH涂片镜检法诊断真菌性角膜炎的意义：杨莉萍，黄文明，樊翌明，李瑞庄【关键词】KOH涂片【摘要】目的:探讨KOH涂片镜检法对真菌性角膜炎的诊断意义，了解湛江地区真菌性角膜炎的病原学。方法:取102例真菌性角膜炎患者的角膜溃疡标本，作KOH涂片镜检、真菌培养及菌种鉴定。结果:KOH涂片镜检法和真菌培养法的阳性率分别为97.1％（99/102）、94.9％（93/98），二者的真菌检出率差异无显著性（P>0.05）。93份培养阳性标本中，共分离出18属33种真菌，其中镰刀菌属、弯孢霉属和曲霉属真菌分别占36

2、.6%、27.9%、7.5%。结论:KOH涂片镜检法是早期诊断本病的简单、有效方法。镰刀菌和弯孢霉是湛江地区真菌性角膜炎的主要致病菌。【关键词】角膜炎；真菌；培养【Abstract】Objective:ToinvestigatethediagnosticvalueofpotassiumhydroxidebasedsmearassayformycotickeratitisandthepathogenicspectruminZhanjiangarea.Methods:Thecornealscrapingsfrom1

3、02patientsearbeforemicroscopicobservation,fungalcultureandstrainidentification.Results:ThepositiveratesoffungalinfectionoffungalkeratitisdetectedbyKOHbasedsmearandfungalcultureethods(P>0.05).Thepathogenicfungibelongedto18genusand33species；of,Curvulariaand

4、Aspergillusaccountedfor36.6%,27.9%and7.5%,respectively.Conclusion:TheKOHbasedsmearissimpleandeffectiveintheearlydiagnosisoffungalkeratitis.FusariumandCurvulariaarethepredominantpathogensofmycotickeratitisinZhanjiangdistrict.【Keyin后在无菌操作下用手术刀刮取角膜溃疡组织，置于含少量灭菌生

5、理盐水的无菌离心管中送检。1.3KOH涂片镜检用无菌白金耳挑取适量送检的角膜溃疡组织置于载玻片上，涂片时尽量将角膜组织薄层铺开，加1滴10%KOH液，盖上盖玻片，显微镜下查找真菌。1.4真菌培养将余下的角膜溃疡组织接种于2支沙氏培养基（SDA）试管斜面上，27℃培养2～3周，观察有无真菌生长。1.5菌种鉴定2支SDA试管中均有真菌生长，且菌落形态一致者，初步确定其为致病菌。取其菌落移种于葡萄糖马铃薯琼脂（PDA）或察氏培养基平皿上，27℃培养2周，观察其生长形态及速度；同时将菌落移种于PDA或察氏培养基行微量培

6、养，每天镜下观察真菌菌丝和分生孢子生长情况。根据菌落颜色、形态、生长速度及有无液体渗出，以及菌落涂片和微量培养镜下菌丝颜色、形态和分生孢子的形态、结构及产孢方式等特点，进行菌种鉴定［78］。1.6统计学处理采用配对卡方检验。2结果102份角膜溃疡标本中均检出真菌，其中4份因缺乏标本而未作真菌培养。KOH涂片镜检102份，其中阳性99份（97.1％），阴性3份（2.9％）；真菌培养98份，其中阳性93份（94.9％），阴性5份（5.1％）（表1）。在KOH涂片镜检阴性的3份标本中，真菌培养分离出面包串珠霉菌、顶套

7、菌和丛生菌各1例。真菌一般在3～4d内开始生长，但培养基需要保存4～6周。93份培养阳性标本中，共分离出18属33种真菌，其中以镰刀菌属、弯孢霉属和曲霉属真菌多见（表2）。表198份角膜溃疡标本中KOH涂片镜检法与真菌培养法结果的比较表293例真菌性角膜炎的致病真菌分类3讨论虽然临床表现有助于真菌性角膜炎的诊断，但明确诊断依赖于实验室检查，如角膜刮片或活检标本直接镜检、染色检查、组织病理检查、真菌培养、共焦显微镜和PCR技术［23］。尽管真菌直接镜检不能鉴别感染的菌种，但其是快速诊断真菌性角膜炎的重要方法。以真

8、菌培养为标准，KOH涂片镜检法对真菌性角膜炎的敏感度为72.2％～91％，Gram染色为31.6％～98.0％，Giemsa染色为27.0％～85.0％，calcofluoricmycoses［J］.ClinMicrobiolRev,2003,16(4):730797.［3］SRINIVASANM.Fungalkeratitis［J］.CurrOpinOphthalmol,2004,1