紫荆花总黄酮提取工艺的优化研究

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1、紫荆花总黄酮提取工艺的优化研究作者：徐美奕韩雅莉陈志红【摘要】目的筛选紫荆花总黄酮的最佳提取工艺条件。方法通过水提、水提醇沉、醇提及酸醇提取4种工艺比较，确定采用醇提工艺；采用L9(34)正交试验来确定醇提优化提取工艺条件。结果紫荆花总黄酮的优化提取工艺条件为15倍量55%乙醇、100℃水浴、每次2h回流提取3次，总黄酮平均得率为7.32%，RSD为1.44%～1.88%。结论优化提取工艺简单、稳定、可行。.L.编辑。【关键词】紫荆花总黄酮提取正交实验　　Abstract：ObjectiveTo

2、optimizetheextractionconditionsoftotalflavonoidsinCercischinensisBge.MethodsBasedonparisonof4kindsofed.TheparametersofethylalcoholextractionedandconfirmedbyL9(34)orthogonaltest.ResultsTheoptimumextractionconditionsoftotalflavonoidsinCercischinensisBg

3、eeof55%ethylalcohol,2hhotes.Averageextractionrateoftotalflavonoidsizedprocessissimple,stableandefficient.　　Keya公司提供。　　1.3药材紫荆花采集于广东医学院校园内，采集时间为200611～12。采摘干净的紫荆花置于阴凉通风处晾干，摘除花柄，用不锈钢剪刀将花瓣剪碎，粉碎，密封后置-20℃保存备用。　　1.4试剂所有实验试剂均为分析纯。　　2方法与结果　　2.1不同提取工艺实验　　2.1

4、.1水提　　称取紫荆花粉10g，加20倍量双蒸馏水，于100℃水浴回流2h，纱布过滤，滤渣中再加双蒸馏水100ml于100℃回流2h，重复1次，合并滤液，抽滤。滤液用旋转蒸发仪减压浓缩，真空干燥。　　2.1.2水提醇沉　　称取花粉10g，加20倍量水100℃回流2h，纱布过滤，滤渣中再加水100ml于100℃回流2h，重复1次，合并滤液，抽滤。滤液减压浓缩至原体积的1/6，加入3倍量无水乙醇，4℃放置24h沉淀，抽滤，滤液减压浓缩，真空干燥。　　2.1.3醇提称取花粉10g，加20倍量75%乙醇

5、，100℃回流2h，纱布过滤，滤渣中再加75%乙醇100ml于100℃回流2h，重复1次，合并滤液，抽滤。滤液减压浓缩，真空干燥。　　2.1.4酸醇提取称取花粉10g，加20倍量75%乙醇，调pH为3～4，100℃回流2h，纱布过滤，滤渣中再加75%乙醇(pH3～4)100ml于100℃回流2h，重复1次，合并滤液，抽滤。滤液减压浓缩，真空干燥。　　2.2含量测定　　2.2.1标准曲线的制备［6］　　精确称取干燥至恒重的芦丁对照品5.0mg于25ml容量瓶中，用乙醇溶解、定容。分别取1.0，2.

6、0，3.0，4.0，5.0，6.0，7.0ml标准品溶液于25ml容量瓶中，加入5%亚硝酸钠溶液1ml，摇匀，放置6min，加入10%硝酸铝溶液1ml，摇匀，放置6min，加入10%氢氧化钠10ml，加水至刻度，摇匀，放置15min。在510nm波长测定吸光度，以芦丁标准品溶液浓度(C)为横坐标，吸光度(A)为纵坐标，得回归方程为A=14.163C-0.0045，相关系数r=0.9992。　　2.2.2样品总黄酮含量的测定精确称取不同方法提取的浸膏粉末，用70%乙醇溶解并定容至25ml，分别吸取

7、3ml于25ml容量瓶中，按标准曲线制备各项处理，在510nm波长测定吸光度，代入回归方程，计算总黄酮含量。总黄酮含量见表1，单因素方差分析见表2。表1不同提取工艺实验结果（略）表2单因素方差分析表（略）从表1结果可见，以生药总黄酮得率为评价指标，较佳的提取工艺为酸醇提取法和醇提法，考虑到实际操作上酸碱对仪器的腐蚀，优选乙醇提取工艺。从表2结果可见，各提取工艺间有显著性差异(P<0.01)。　　2.3醇提优化工艺研究　　2.3.1正交实验　　根据黄酮提取条件，选取提取温度(A)、乙醇浓度(

8、B)、提取时间(C)、溶剂用量(D)4个因素，各取3个水平，进行L9(34)正交实验，回流次数3次，因素水平见表3，以生药总黄酮得率为考察指标。结果见表4，方差分析见表5。表3因素水平（略）表4L9(34)正交实验设计方案与实验结果（略）表5方差分析结果（略）表4结果表明，由极差R可知温度(A)、乙醇浓度(B)、提取时间(C)、溶剂用量(D)4个因素对紫荆花总黄酮的影响程度不同，各因素的影响程度依次为：乙醇浓度(B)>温度(A)>提取时间(C)>溶剂用量(D)；实验优方案为A3