153例假性血小板减少原因的实验研究

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1、153例假性血小板减少原因的实验研究【摘要】目的：探讨假性血小板减少的影响因素及解决办法。方法：重新抽静脉血分别用EDTAK2和EDTAK2·NaF抗凝，1h后用SysmexSF-3000血液分析仪检测，2次仪器检测值与人工显微镜计数值进行比较。结果：在PTCP与IVBC两组中，比较第一次测定值与人工计数值以及第一次测定值与第二次测定值，两者差异都有显著性(P<0.01)。然而，比较第二次测定值与人工计数值，差异无显著性(P>0.05)。在LPF与SPF两组中，第一次测定值和第二次测定值与人工计数值比较，两者差异有显著性(P<0.0

2、1)。比较第一次测定值与第二次测定值，两者差异无显著性(P>0.05)。结论：抽血不当和EDTA依赖性凝集是造成假性血小板减少的主要因素，EDTA依赖性凝集患者需用EDTAK2·NaF抗凝血检测；有大血小板和小血小板干扰检测时，须手工显微镜计数，应加强血片的复检。【关键词】血小板；血小板计数；血细胞分析仪；假性血小板减少；原因分析　　目前，由于全自动血细胞分析仪的广泛使用，使血小板的检测常规化，具有快速、简便、重复性好的优点，但经常出现假性血小板减少的检测结果，造成错误的临床诊断，这是检验工一直关注的问题。为了探讨假性血小板减少的形成原因，我们进

3、行了系列的实验研究，现报告如下。　　1资料与方法　　1.1器材SF-3000血液分析仪(日本Sysmex公司)；EDTAK2抗凝管(湖南省浏阳市医用仪具厂)；CH2双目显微镜(日本OLYMPUS公司。　　1.2试剂SF-3000血液分析仪配套试剂(日本Sysmex公司)；草酸铵稀释液及瑞氏染液(按照第2版全国临床检验操作规程配制)；氟化钠(NaF)，分析纯AR(无锡亚盛化工有限公司)CHECK质控血(日本Sysmex公司)。　　1.3EDTAK2·NaF抗凝管制备氟化钠6g加100ml蒸馏水，取100μl置于EDTAK2抗凝管中，56℃烤干备用［

4、1］。　　1.4试验标本的选择2005年5月至2006年3月住院患者的血常规样本中(EDTAK2抗凝)，将PLT<100×109/L的标本选出，涂血片复检，去除相符合的标本(血片中无聚集血小板、散在分布；与人工显微镜计数值相符，在±3SD内)，即为假性血小板减少，作为实验标本，共计153例，其中骨科12例，呼吸科18例，心血管22例，产科10例，肿瘤科16例，血液科13例，新生儿30例，老年科32例；其男性81例，女性72例；年龄范围2h～82岁，平均年龄45.3岁。其测定值作为第一次测定值列入结果统计。分析前，仪器常规保养，本底计数正常，中、低

5、2个批号的质控血检测均在控，严格按标准操作程序上机检测。　　1.5方法步骤由2位经验丰富的检验师对这153例患者重新抽血2ml，分别加入1ml于EDTAK2抗凝管(A管)和EDTAK2·NaF抗凝管(B管)中，充分混匀，室温放置1h，同时取未抗凝血20μl加入含0.38ml草酸铵稀释液的试管中，严格按照全国临床检验操作规程［2］(第2版)进行血小板人工显微镜计数，每个标本由2个人分别计数2次取平均值作为参考值；1h后分别将A管和B管抗凝血涂血片经瑞氏染色显微镜下观察，根据A、B两血片中有无聚集的血小板、大小血小板的分布以及血标本有无黄疸脂血等，将15

6、3例假性血小板减少标本分为5组即EDTA依赖性凝集(EDTAdependentpseudothrombocytopenia,PTCP)：A血片中有大量血小板聚集，一般为10个～20个血小板聚集成堆，更大的聚集可有50个以上，而与之相对应的B管血涂片则无聚集血小板，血小板呈散在分布。大血小板组(largeplatelet,LP):A管和B管抗凝血涂片中均无成簇血小板、血小板散在分布、以大血小板为主。小血小板(smallplatelet,SP):A管和B管抗凝血涂片中均无成簇血小板、血小板散在分布、以小血小板为主。抽血不当因素(impropervenipu

7、nctureforbloodcollection,IVBC):A管和B管抗凝血涂片中均无成簇血小板、血小板散在分布、大小较为均一，标本无黄疸脂血等异常，而重抽血前的第一次抗凝血涂片中有大量聚集的血小板。其他因素：A管和B管抗凝血涂片中均无成簇血小板、血小板散在分布、大小较为均一，标本有黄疸、脂血等异常变化。把EDTA依赖性凝集组，用B管血，其余组用A管血上机检测，这次检测值作为第二次测定值进行统计。选公务员招收体检血50例作EDTA依赖性凝集因素正常对照，男32例，女18例，年龄23岁～29岁。抽血2ml，分别加入1ml于EDTAK2·NaF抗凝管（C

8、）管和EDTAK2·NaF抗凝管(D管)中，充分混匀，室温放置1h后，分别上机