皂角刺皂苷对大鼠前列腺增生模型影响的实验研究

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1、皂角刺皂苷对大鼠前列腺增生模型影响的实验研究【摘要】　　目的探讨中药皂角刺提取物皂角刺皂苷对前列腺增生(BPH)的影响及作用机制。方法将40只SD大鼠去势7d后皮下注射丙酸睾酮5mg/kg，同时实验组灌胃给予皂角刺皂苷溶液4，2mg/kg，癃闭舒组灌胃给予癃闭舒胶囊100mg/kg。于给药30d后处死，观察前列腺重量和组织结构改变，并通过免疫组化法检测PA和bFGF表达的变化。结果实验组大鼠前列腺重量、PA指数及bFGF表达水平均低于模型对照组，其中尤以皂角刺皂苷大剂量组最显著(P<0.01)。皂角刺皂苷大剂量组与癃闭舒组比较差异亦有显著性，

2、而皂角刺皂苷小剂量组与癃闭舒组比较无显著差异。结论皂角刺能明显抑制模型大鼠的BPH，其机制可能是通过抑制前列腺细胞的增殖及减少前列腺组织中bFGF的表达而实现的。【关键词】皂角刺皂角刺皂苷前列腺增生　　Abstract：ObjectiveTostudytheeffectofChineseHoneylocustSpineonbenignprostatichyperplasia(BPH)anditsmechanism.MethodsFortyovariectomizedSDratsinisteredtestosteronepropionate5mg/k

3、gsubcutaneously.Atthesametime,saponinhighandlog/kgand2mg/kgbyoraladministrationandLongbishuCapsule(LBS)groupg/kg.Theratsicroscopicexaminationeansofimmunochemicaltechnology.ResultsTheedicatedgroupsodelgroup,especiallyinsaponinhighdosegroup.Thedifferencebetarkable.Butitechanismm

4、ightbetheinhibitionofcellhyperplasiaofprostateandtheexpressionofbFGF.　　Keyentalstudy　　中药皂角刺为植物皂角树的棘，是一味传统的中药材，具有穿透肿毒、破坚消积、消肿排脓等功效。现代研究表明皂角刺含有皂苷、黄酮、酚类、氨基酸等多种生物活性成分，具有抗凝、免疫调节、抗肝纤维化等作用。祖国医学史上很早就有用皂角刺治疗癃闭的记载，现代中医运用皂角刺治疗前列腺增生亦取得了较好的疗效。但对皂角刺治疗前列腺增生的主要活性成分及可能作用机制还未见研究，我们拟通过研究皂角刺皂苷对前列

5、腺增生模型的作用，探讨皂角刺治疗前列腺增生的主要活性成分及可能机制。　　1材料与方法　　1.1材料　　丙酸睾酮注射液，2ml/支，含丙酸睾酮25mg/ml，由天津氨基酸公司生产(批号050419)；皂角刺皂苷由本实验室提取。癃闭舒胶囊，0.3g/粒，石家庄科迪药业有限公司生产(批号050401);PA单克隆抗体及LSAB试剂盒由Dako公司提供；bFGF抗体由美国Sigma公司生产；分析天平；双目光学显微镜；德国Leica多媒体彩色病理图文分析系统。　　1.2分组及处理40只健康雄性SD大鼠，预养3d，编号称重，均腹腔注射0.2%的戊巴比妥钠(1m

6、l/kg)麻醉，无菌经腹腔摘除双侧睾丸，恢复7d后再随机分为睾酮模型组，皂角刺皂苷小剂量组、皂角刺皂苷大剂量组、癃闭舒组，每只大鼠每天均皮下注射丙酸睾酮5mg/kg，同时，皂角刺皂苷大剂量组和皂角刺皂苷小剂量组分别每天给予皂角刺皂苷溶液40，20mg/kg灌胃，癃闭舒组给予癃闭舒胶囊100mg/kg灌胃，睾酮组给予等体积的生理盐水灌胃，30d后称重处死，摘取大鼠前列腺并用分析天平称重，同时制作光镜及免疫组化标本。　　1.3检测指标及方法　　1.3.1前列腺指数(PI)的计算PI＝前列腺重量(mg)/大鼠体重(g)　　1.3.2PA测定　　采用LSA

7、B法，将前列腺组织常规石蜡包埋，切片，脱蜡后放入柠檬酸(pH6.0)缓冲液中，置微波炉处理(170in)，加一抗(稀释度为1∶80)4℃过夜，二抗和三抗在湿盒孵育1h，各步间均用PBS洗片，细胞核染成棕黄色为PA阳性细胞，每标本上数100个细胞，计算阳性细胞数，算出PA指数。　　1.3.3bFGF测定　　切片常规脱蜡，ABC法染色，滴加bFGF抗体，一抗滴度为1∶100；PBS洗后滴加二抗，滴度为1∶200；三抗滴度1∶200；DAB显色，以二甲苯透明，最后以光学树脂胶封固，备检测用。采用多媒体彩色病理图文分析系统，对每张免疫组化切片进行bFGF显

8、微图像定量分析。　　1.3.4病理切片　　每例标本均进行常规H.E染色，光镜下观察组织病理学变化。　　1.4统计学处理运用