小叶榕叶总黄酮含量测定、鉴别及其对羟自由基清除作用的研究

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1、小叶榕叶总黄酮含量测定、鉴别及其对羟自由基清除作用的研究作者：刘力恒，王立升，王天文，刘雄民，杨晓青【摘要】目的探讨小叶榕叶提取物中总黄酮的测定方法及其对羟自由基的清除能力。方法采用改进的铝盐显色分光光度法，在500nm波长下，NaNO2-AlCl3-NaOH为显色剂，常温显色。结果20min内测定了小叶榕叶提取物中总黄酮的含量，回归方程为A=0.0136C-0.0031，RSD=1.44%，相关系数为0.9997，加标回收率达到98.86%。结论该测定方法准确、可靠，结果令人满意；提取液总黄酮含量的增加，对羟自由基的清除能力也增

2、强。【关键词】小叶榕；鉴别；羟自由基;紫外分光光度法Abstract:ObjectiveToestablishamethodforthedeterminationoftotalflavononefromFicusmvercarpalfandstudyitsscavengingactivityonhydroxylradicals.MethodsTheflavonoidsinFicusmicroearpaL.f.inedbyultravioletspectrophotometryat500nm.ResultsThecorrelatio

3、ncoefficientofthestandcurvel-1.Theaveragerecoveryrateethodissimple,accurateandreliable;thetotalflavonoidshavescavengingcapacityonhydroxylradicalsinadependentmanner.KeyicrocarpaL.f.;Distinction;Hydroxylradicals;UVSpectrophtometry小叶榕叶为桑科植物榕树FicusmicrocarpaL.f.的叶，异名落地金钱(

4、《本草求原》)。全世界榕树有八百多种，主要分布在热带亚热带地区。我国榕属植物约100种，属热带雨林的关键种类，主要分布在福建、广东、广西、海南、浙江和中国台湾等地区，为当地的主要植物品种之一。入药主用其叶FoliumFiciMicrocarpae。有研究表明［1～8］小叶榕叶中主要含黄酮、三萜类、齐墩果酸、脂肪族化合物和甾体化合物等。其中黄酮类和内酯类等有效成分对治疗冠心病、老年性痴呆、脑血栓、神经系统疾病和消除自由基、抗炎、抑菌、抗癌等方面有显著效果,无毒副作用，并以此开发出多种药品和保健食品［9，10］。黄酮类(flavont

5、es)化合物是植物光合作用产生的一大类化合物，已知的此类化合物约有二千多种，有以黄酮(22苯基色酮)为母核的一类黄色色素和黄酮的同分异构体及其还原产物，还包括黄酮醇类、异黄酮类、儿茶素类、双黄酮类及其衍生物。目前对银杏类黄酮的研究较多，但对于榕树黄酮类化合物的研究还相对比较缺乏。广西是我国小叶榕产量最大的省份之一，而对于它的利用存在着深加工产品少、生产技术落后和资源不能合理利用等缺点。目前我国对小叶榕的利用只是处于起步阶段，还未真正找到合理有效的利用途径。虽然用小叶榕浸膏作为主成分的哮喘和慢性支气管炎治疗药咳特灵胶囊已收载在部颁标

6、准中，但小叶榕浸膏质量标准中没有详细的质量控制方法，仅仅是检查其水不溶物和测定其浸出物，这样的质量标准不能准确地反应其量效关系，究其主要的原因，是没有对其成分及其药理活性进行深入地研究。目前天然药用植物中黄酮类化合物测定方法主要有紫外可见分光光度法［11］、高效液相色谱法［12］、薄层色谱法等［13～15］。为此，本文采用改进的铝盐显色分光光度法测定了小叶榕叶醇提取物中总黄酮的含量并对其进行了鉴别，并就该提取液对Fenton体系产生的羟自由基的清除作用进行了研究。1器材自然干燥的小叶榕树叶、无水乙醇(AR)，2550紫外可见分光光

7、度计(日本岛津)，芦丁对照品(中国药品生物制品检定所)。RE-2000型旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂)，SHB-Ⅲ循环式多用真空泵(郑州长城科工贸有限公司)。2方法与结果2.1小叶榕叶总黄酮成分提取研究小叶榕叶中黄酮类化合物提取方法时，一般采用溶剂直接提取后浓缩。而笔者在实验过程中发现，小叶榕叶中所含的脂溶性色素等物质会使显色法测定总黄酮时产生浑浊现象，造成很大误差。因此，本实验采用石油醚脱脂，冷却静置后过滤除去叶绿素后再测定总黄酮的工艺。准确称取落地金钱干燥品200g，70%乙醇回流提取，过滤，回收乙醇，蒸至约100ml，用1

8、00ml石油醚萃取3次，萃取液低温冷却静置48h，过滤沉淀，萃取液蒸干得到粗提物。2.2总黄酮的测定2.2.1测定方法依据以芦丁为对照品测定榕树叶中总黄酮的含量，加入铝离子试剂，同时控制适宜pH值，使黄酮化合物与铝盐形成络合物，在可见光区能获得稳定