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时间:2018-05-05
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1、阻断乙型肝炎病毒母婴宫内传播对血清病毒DNA和转录体影响的研究作者:王清图修霞郭永刘兰玉牟莹莹张伟刘节崔云【关键词】乙型肝炎病毒 【摘要】目的进一步探讨阻断乙型肝炎病毒(HBV)母婴垂直传播的效果,明确携带HBV生育期妇女干预治疗对保护婴儿抗-HBV感染的意义。寻找乙型肝炎病毒转录体的检测在母婴传播诊断中的意义。方法224例HBsAg/HBeAg阳性孕妇分为两组,乙肝免疫球蛋白(HBIG)与左旋咪唑涂布剂治疗组154例,对照组70例。治疗组均在孕26周起开始阻断治疗。用酶联免疫吸附法(ELISA)检测孕妇和新生儿血清中的HBsAg等免疫学标记物,自母亲及
2、其婴儿血清和母亲乳汁中提取核酸,经PCR及RT-PCR分别扩增HBV-DNA和RNA,琼脂糖凝胶电泳显示产物,Southern-blotting验证反应的特异性,取代表性产物克隆、测序,检测血清HBV-DNA及全长型(fRNA)和顿挫性转录体。结果治疗组和对照组新生儿外周血中HBsAg、HBV-DNA、fRNA和trRNA的阳性率分别为7.1%、3.3%、3.3%、47.5%和31.4%、6.7%、13.3%、70.0%,治疗组的前三项指标明显低于对照组(P<0.01),但后一项检测指标差异无显著性(P>0.05)。HBeAg(+)母亲的HBV
3、-DNA(75%)和fRNA的表达(65%)显著高于HBeAg(-)的母亲(P<0.05);所有表达fRNA的母亲也同时表达trRNA,在20例HBV-DNA(-)、fRNA(-)的母亲中,仍有8个可检测到trRNA。婴儿HBV-DNA(4.55%)和fRNA(6.81%)的表达较其母亲显著降低;占优势表达的是trRNA(52.27%),且与其母亲trRNA的表达状态密切相关。母亲为trRNA(+)的婴儿trRNA的表达显著高于母亲为trRNA(-)者。15例HBsAb(+)的婴儿均未检出HBV-DNA和fRNA,但11例仍可检测到trRNA。结论携
4、带HBV孕妇于孕晚期给予HBIG和左旋咪唑涂布剂联合治疗后,婴儿HBsAg、HBV-DNA和fRNA携带率明显降低。然而,无论治疗组还是对照组,都有超过一半的患儿携带trRNA。与HBV-DNA及其表达产物相比,trRNA在HBV母婴垂直传播过程中有可能是一个出现更早期的可检测指标,它有助于更精确地确定新生儿HBV感染的状态。 关键词孕期干预治疗乙型肝炎病毒宫内传播左旋咪唑涂布剂乙肝免疫球蛋白病毒转录体 AnobservationontheverticaltransmissionofhepatitisBvirusdemonstratedbyseroas
5、saysforviraltranscripts,DNAandprotEins 【Abstract】ObjectiveTofurtherinvestigatethepreventiveeffectsondifferentinterventionapproachesonmother-infantverticaltransmissionofhepatitisBvirus(HBV).Toinvestigatethecharicteristicsandclinicalsignifi-canceofHBVtranscripts(thefulllengthandtru
6、ncatedRNAmolecules)intransmittingfrommothertoinfant.Meth-ods224casesofchronicHBsAg-carriersinpregnancymunoglobulininjectionsandlevamisolelinimentsincethe26thentandarkers,includingHBsAg,HBsAb,HBeAg,HBeAbandHB-cAb,inedbyELISA.TheviralDNAanddifferenttypesoftranscriptsintheseraviralnu
7、cleicacidsextractedfrompairsofmotherandinfantedbySouthernblotting.Representativeamplificationproductsthetreatmentandreferencegroupse-ters,ratherthanthelastone,beingsignificantlyreducedintheformergroupthanthoseinthelatter.TheexpressionofXDNA(75%)andfRNA(65%)inHBeAg(+)mothersothers(
8、P<0.05).Allthemothersexpressin
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