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时间:2018-05-05
《原花青素对大鼠脑缺血再灌注损伤抗炎机制研究》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在应用文档-天天文库。
1、原花青素对大鼠脑缺血再灌注损伤抗炎机制研究【摘要】目的研究原花青素(GSP)对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤抗炎作用机制。方法大鼠脑缺血再灌注模型完成后,缺血2h再灌注24h,其中原花青素大剂量组(40mg/kg)、小剂量组(10mg/kg)术前7d分别腹腔注射2ml/kgGSP,模型组腹腔注射2ml/kg生理盐水,1次/d,再灌注前15min加注1次。观察不同剂量的原花青素对脑组织一氧化氮(NO)含量、髓过氧化物酶(MPO)活性和脑组织神经细胞的细胞间黏附分子-1(ICAM-1)蛋白的表达的影响。结果原花青素可显著减轻大鼠脑缺血再灌注损伤的行为评分;显著降低脑组织中NO含量和MPO的活性,
2、差异有统计学意义(P<0.05);ICAM-1蛋白的阳性表达率降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论原花青素对大鼠脑缺血再灌注损伤有保护作用,作用机制之一可能与其抑制炎性反应有关。 【关键词】原花青素;脑缺血再灌注损伤;细胞间粘附分子-1;髓过氧化物酶;一氧化氮 【Abstract】ObjectiveToinvestigatetheAnti-Inflammatorymechanismsofgrapeseedprocyanidin(GSP)oncerebralischemiareperfusioninjury(CIRI)ofrats.MethodsThemod
3、elofMCAOinalsuturetechnique.After2hofocclusionand24hofreperfusion,ThehighdoseGSP(40mg/kg)groupandlog/kg)group.oretimein15minutesbeforeoperation.ThecontentsofNOandactivitiesofMPOinbraintissueofischemichemisphereeasured;theexpressionofICAM-1inthecortexeasuredbyimmunohistochemicalmethod.ResultsThene
4、urologicalscoresofratstreatedodelgrouprats(P<0.05);therearkeddecreaseofMPOinGSPgroupparedodelgroup(P<0.05);paredodelgroup,theexpressionofICAM-1iareperfusioninjury,oneofthemechanismscouldbetheAnti-Inflammatoryeffectofprocyanidin 【Keyi法制作大脑中动脉栓塞(MCAO)模型。术前禁食12h,自由饮水,手术过程中用加热垫和灯泡保持大鼠体温。手术在30
5、min内完成,缺血2h后,将栓线抽出再灌注24h,恢复MCA供血。 1.3神经功能评分参考ZeaLonga的5分制评分标准。 1.4标本制备及指标测定断头取缺血侧的半暗带皮质备用。电子天平称取脑组织块约0.1g,冰冷生理盐水冲洗残余血液,滤纸拭干,加入Tris缓冲液用玻璃匀浆器制成10%的脑组织匀浆4℃离心3500转/min,15min,取上清液进行NO、MPO的测定。取缺血侧半暗带区皮质于固定液中固定,用于免疫组化样本的制作。 1.5统计学方法所有数据均用均值±标准差(x±s)表示,应用SPSS11.5软件进行统计,采用多个样本比较方差分析,P<0.05为显著性检验标
6、准。 2结果 2.1GSP对大鼠CIRI后神经功能的影响GSP大、小剂量组都能改善大鼠神经功能障碍症状,肌力表现增强,其行为评分与模型组相比差异均有统计学意义(P<0.05)。 2.2GSP对大鼠CIRI后脑组织NO、MPO含量的影响与假手术组比较,模型组大鼠脑组织NO含量MPO活性显著增高,GSP大、小剂量组可显著降低脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织血清中NO、MPO含量,与模型组比较,差异具有统计学意义(P<0.05),结果见表1。 2.3GSP对大鼠CIRI后缺血半暗带脑组织ICAM-1表达的影响与模型组比较,GSP大剂量组ICAM-1表达表达明显降低,可
7、见少量细胞浆内有棕黄色颗粒,阳性表达阳性率显著低于模型组,且大剂量组较小剂量组阳性细胞数降低明显,差异均有统计学意义(P<0.05)。结果见表2、图1、2。 3讨论 NO通过超氧自由基(O-2)发挥细胞毒性作用,生成强氧化剂硝基阴离子(ONOO-),后者可导致级联式神经损伤;髓过氧化物酶(MPO)主要存在于中性粒细胞中,中性粒细胞被激活后,可通过脱颗粒作用释放一种重要的髓过氧化物酶即MPO到胞外或吞噬小体内,催化H2O2
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