中华补血草根提取物抗四氯化碳急性肝损伤的实验研究

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1、中华补血草根提取物抗四氯化碳急性肝损伤的实验研究作者：汤新慧高静陈瑾徐力致【摘要】目的研究中华补血草根提取物（theLimoniumsinenseKtzerootextract,LSE）对小鼠急性肝损伤的防护作用及药理机制。方法建立小鼠四氯化碳（CCl4）肝损伤模型，检测LSE对血清天冬氨酸氨基转移酶（AST）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）活性的影响；观察肝细胞超微结构的变化；测定肝线粒体膜电位以及线粒体对高钙诱发肿胀的敏感性的变化。结果一定剂量（100～400mg/kg）LSE能有效抑制CCl4引起的小鼠血清AST及ALT活性

2、的显著上升；明显减轻肝损伤引起的小鼠肝脏线粒体形态结构的破坏；抑制线粒体膜电位的降低以及线粒体对外加高钙诱发肿胀敏感性的下降。结论LSE对CCl4诱导的急性肝损伤具显著的防护作用，其机理可能与保护肝脏线粒体有关。【关键词】中华补血草四氯化碳肝损伤线粒体　　Abstract:ObjectiveTostudythehepatoprotectiveeffectofLimoniumsinense(Girard)Ktzerootextract(LSE)andthepossiblemechanismsunderlyingitsprotec

3、tiononacuteliverinjuryinducedbycarbontetrachloride(CCl4).MethodsCCl4-inducedliverinjurymodelaspartateaminotransferase(AST)andalanineaminotransferase(ALT)inmice.Ultrastructureofliveritochondrialmembranepotentialandmitochondrialseasuredfolloentof100mg/kg,200mg/kgor400

4、mg/kgLSE,theincreaseinserumASTandALTactivitiesinducedbyCCl4orphologicalchangesinlivermitochondriaarkablylessened.Inaddition,thedecreaseinmitochondrialmembranepotentialandsensitivityofmitochondrialsulationinducedbyCCl4echanismsunderlyingitsprotectiveeffectmayberelate

5、dtoitsprotectiononlivermitochondria.　　Keyoniumsinense(Girard)Ktze;Carbontetrachloride;Liverdamage;Mitochondria　　中华补血草Limoniumsinense(Girard)Kuntz系白丹花科补血草属多年生泌盐草本植物，喜生于沿海盐渍化的低洼湿地上，广泛分布于我国东北、华北及陕、甘、宁和苏北等地区。除具有较高观赏价值、环境保护等作用外，具有一定药用价值。成分分析表明，该植物化学成分十分丰富，含有多糖、鞣质、萜类、黄酮类，

6、以及氨基酸、矿物质等［1～2］。据记载，该植物具有补血、止血、散淤、调经、益脾、健胃等多种功效。然而，关于该植物的药理研究和临床应用相对滞后，目前中华补血草药理作用的研究主要集中在其抗菌止血方面，临床上主要用于治疗功能性子宫出血症［3］。最新的研究初步发现，中华补血草提取物能抑制CCl4及D-GalN肝损伤动物血清转氨酶活性的升高［4］，提示该植物可能具有对抗肝损伤作用。然而中华补血草的护肝作用还缺乏全面、深入的研究，其药理机制有待于进一步考察。　　本研究拟采用CCl4小鼠急性肝损伤模型，运用肝细胞超微结构观察，酶活力测定以及

7、线粒体膜电位测定、肿胀敏感性测定等方法，研究中华补血草根提取物（LSE）对小鼠急性肝损伤的防护作用并探讨其药理机制。　　1材料和方法　　1.1中华补血草根提取物（LSE）的制备中华补血草采集于江苏盐城滩涂，由江苏省滩涂生物资源与环境保护重点建设实验室于延球副教授鉴定。取中华补血草干燥全根100g，粉碎，用蒸馏水提取1～3次，合并提取液，浓缩、干燥，即得棕色干粉32.9g（得率32.9%）。　　1.2仪器与试剂7520分光光度计，上海分析仪器厂；BiofugePrimoR冷冻离心机，Kendro公司；Hitachi7600-02

8、0全自动生化分析仪、Hitachi850型荧光分光光度计，日立公司；Flexi-DryTM冷冻干燥仪，StoneRidge公司；JEM100CX透射电子显微镜，日本电子公司。　　罗丹明（Rh123），甘露醇、蔗糖、EDTA、琥珀酸、鱼藤酮，购自Sigma公司；Tris-HCl