中华补血草根提取物抗四氯化碳急性肝损伤的实验研究论文

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1、中华补血草根提取物抗四氯化碳急性肝损伤的实验研究论文汤新慧高静陈瑾徐力致【摘要】目的研究中华补血草根提取物（theLimoniumsinenseKtzerootextract,LSE）对小鼠急性肝损伤的防护作用及药理机制。方法建立小鼠四氯化碳（CCl4）肝损伤模型，检测LSE对血清天冬氨酸氨基转移酶（AST）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）活性的影响；观察肝细胞超微结构的变化；测定肝线粒体膜电位以及线粒体对高钙诱发肿胀的敏感性的变化。结果一定剂量（100～400mg/kg）LSE能有效抑制CCl4引起的小鼠血清AST及ALT活性的显著

2、上升；明显减轻肝损伤引起的小鼠肝脏线粒体形态结构的破坏；抑制线粒体膜电位的降低以及线粒体对外加高钙诱发肿胀敏感性的下降。结论LSE对CCl4诱导的急性肝损伤具显著的防护作用，其机理可能与保护肝脏线粒体有关。【关键词】中华补血草四氯化碳肝损伤线粒体Abstract:ObjectiveTostudythehepatoprotectiveeffectofLimoniumsinense(Girard)Ktzerootextract(LSE)andthepossiblemechanismsunderlyingitsprotectionona

3、cuteliverinjuryinducedbycarbontetrachloride(CCl4).MethodsCCl4-inducedliverinjurymodelaspartateaminotransferase(AST)andalanineaminotransferase(ALT)inmice.Ultrastructureofliveritochondrialmembranepotentialandmitochondrialseasuredfolloentof100mg/kg,200mg/kgor400mg/kgLSE,

4、theincreaseinserumASTandALTactivitiesinducedbyCCl4orphologicalchangesinlivermitochondriaarkablylessened.Inaddition,thedecreaseinmitochondrialmembranepotentialandsensitivityofmitochondrialsulationinducedbyCCl4echanismsunderlyingitsprotectiveeffectmayberelatedtoitsprote

5、ctiononlivermitochondria.Keyoniumsinense(Girard)Ktze;Carbontetrachloride;Liverdamage;Mitochondria中华补血草Limoniumsinense(Girard)Kuntz系白丹花科补血草属多年生泌盐草本植物，喜生于沿海盐渍化的低洼湿地上，广泛分布于我国东北、华北及陕、甘、宁和苏北等地区。除具有较高观赏价值、环境保护等作用外，具有一定药用价值。成分分析表明，该植物化学成分十分丰富，含有多糖、鞣质、萜类、黄酮类.freeloR冷冻离心机，Kend

6、ro公司；Hitachi7600-020全自动生化分析仪、Hitachi850型荧光分光光度计，日立公司；Flexi-DryTM冷冻干燥仪，StoneRidge公司；JEM100CX透射电子显微镜，日本电子公司。罗丹明（Rh123），甘露醇、蔗糖、EDTA、琥珀酸、鱼藤酮，购自Sigma公司；Tris-HCl，Hepes，购自Promega公司。1.3动物ICR小鼠，雄性，体重18～22g，购自南京医科大学实验动物中心，许可证号：SCXK（苏）2002-0031。1.4方法1.4.1动物分组与给药方法小鼠分5组：正常组、CCl4损

7、伤组、100，200，400mg/kgLSE组。正常组和损伤组小鼠以0.2ml/10g体重生理盐水连续灌胃5d，LSE各剂量组则分别以不同浓度LSE同样方式灌胃；第6天正常组小鼠按10ml/kg腹腔注射橄榄油，其余组小鼠腹腔注射0.15%CCl4(溶于橄榄油中，10ml/kg)。18h后，取血，分离血清，待测血清ALT，AST活力。处死小鼠后，取部分肝组织固定，待制备肝组织电镜切片，其余肝组织匀浆，制备肝脏线粒体。1.4.2生化检测分离得到的各组小鼠血清，全自动生化分析仪测定血清ALT及AST活性。1.4.3形态学观察所取各组小鼠

8、肝组织，4%戊二醛溶液预固定，1%四氧化锇再固定，制备肝组织电镜切片，透射电子显微镜观察肝细胞超微结构。1.4.4线粒体的制备以及膜电位和肿胀度的测定据Apprille法制备肝脏线粒体，考马斯亮蓝法测定蛋白浓度［5］。按照Emaus法，使用荧光染料