熊果酸含量测定方法研究进展

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1、熊果酸含量测定方法研究进展【关键词】熊果酸；含量测定方法　熊果酸（ursolieacid，UA）又名乌索酸、乌苏酸，属于三萜类化合物，广泛存在于熊果、白花蛇舌草、女贞子、乌梅等天然植物和草药中，具有抗炎、护肝、降血脂等多种生物学活性［1～4］。目前许多中药材及其制剂常选用熊果酸的含量作为其质量控制指标。本文对熊果酸含量测定方法的研究进展综述如下。　　1分光光度法　　李国章等［5］建立了湘产3种苦丁茶中熊果酸含量测定的分光光度法，具体操作是取苦丁茶经索氏提取器提取后，加入5%香草醛－冰醋酸、高氯酸显色，在波长548nm处

2、测定吸光度，结果熊果酸在4～20μg·ml-1浓度范围内线性关系良好，加样回收率为98.96%。罗启剑等［6］采用同样方法测定了连钱草中熊果酸含量，结果熊果酸在0～18μg·ml-1浓度范围内线性关系良好，加样回收率为100.64%。　　2薄层扫描法　　白洁等［7］采用双波长薄层扫描法测定了夏枯草中熊果酸的含量，具体操作为取夏枯草药材粗粉经95％乙醇超声提取两次，滤液用70℃水浴蒸干，残渣用石油醚浸泡两次，挥干溶剂，用95％乙醇溶解后测定。采用硅胶G板，以环己烷－氯仿－醋酸乙酯（20∶5∶8）为展开剂，用10％硫酸乙醇

3、溶液显色，选用λS=540nm，λR=700nm进行双波长反射式锯齿扫描，结果熊果酸在0.314～1.570μg范围内线性关系良好，加样回收率为99.3％。张军等［8］建立了狼疮静颗粒中熊果酸的薄层扫描法测定方法，具体操作为取狼疮静颗粒用乙醚萃取3次，合并乙醚萃取液水浴蒸干乙醚，残留物加无水乙醇－氯仿（3∶2）混合液溶解后测定，以环己烷－氯仿－醋酸乙酯－甲酸（20∶5∶8）为展开剂，用10％的硫酸乙醇液显色，以λS=520nm，λR=700nm进行双波长薄层扫描，结果熊果酸在0.498～3.084μg范围内线性关系良好

4、，加样回收率为97.91％。　　3高效液相色谱法　　3.1HPLC－UV法戚志华等［9］采用HPLC法测定了陕西女贞子中熊果酸的含量，其方法为取女贞子粉末经超声提取后采用HPLC法，选用LichrospherC18（4.6mm×250mm，5μm）色谱柱，流动相为乙腈－甲醇－水－磷酸－三乙胺（50∶30∶20∶0.02∶0．04），流速1ml·min-1，测定波长为205nm，结果熊果酸在20.48～102.4μg范围内线性关系良好，加样回收率为100.6％。梁洁等［10］采用HPLC法测定了广西产美味猕猴桃根中熊果酸

5、的含量，具体操作为取美味猕猴桃根粗粉经超声提取后测定，选用ThermoHypersilBDSC18柱（4.6mm×250mm，5μm），流动相为乙腈－0.1％磷酸水溶液（85∶15），流速1.0ml·min-1，检测波长210nm，结果该方法熊果酸线性范围为12.5～150μg·ml-1，平均回收率为99.35％。　　3.2HPLC－ELSD法赵永席等［11］建立了高效液相色谱－蒸发光散射检测法（HPLC－ELSD）测定山茱萸中熊果酸的含量，具体操作为取山茱萸经索氏提取后采用PhenomenexC18（250mm×4.

6、6mm，5μm）色谱柱，流动相为甲醇－0.5％冰醋酸水溶液（87:13），流速0.8ml·min-1，蒸发光散射检测器漂移管温度65℃，载气（N2）流速2.0L·min-1，结果熊果酸在1.16～3.48μg范围内时线性关系良好，平均回收率为97.5％。赵宇新等［12］建立了HPLC－ELSD法测定中药饮片木瓜及中成药制剂知柏地黄丸中熊果酸的含量，其操作为去样品经提取后采用KromasilC18（4.6mm×250mm，5μm）色谱柱，柱温40℃，甲醇－水－冰醋酸（260∶40∶0.15）为流动相，流速0.6ml·mi

7、n-1，漂移管温度85℃，气体流速2.60L·min-1，结果熊果酸在0.380～1.90μg范围内线性关系良好，熊果酸的回收率分别为99.8％。　　3.3HPLC－MS法杨宜华等［13］采用液质连用法测定了白花蛇舌草中熊果酸含量，其操作为取样品经超声提取后选用HypersilODSC18（150mm×4.6mm，5μm）色谱柱，流动相甲醇－0.05％冰醋酸（75∶25），二极管阵列检测器，流速0.2ml·min-1，柱温45℃，质谱采用大气压化学离子化探头，选择性离子流模式（正离子），APCI400℃，CDL250℃

8、，BLOCK250℃，结果熊果酸在20.4～163.2μg·ml-1范围内线性关系良好，加样回收率为100.78％。　　4气相色谱法　　黄建林等［14］建立了测定番石榴叶中熊果酸的气相色谱－质谱（GC－MS）方法，具体操作为取样品经微波萃取后以双（三甲硅烷）三氟乙酰胺（BSTFA）为衍生化试剂，将熊果酸制成三甲基硅烷衍生物后，在D