体外冲击波促进兔acl重建后腱骨愈合的实验研究

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1、体外冲击波促进兔ACL重建后腱骨愈合的实验研究作者：石斌刘玉杰李志超邬晓勇,朱娟丽眭翔张锦佳陈琳【摘要】［目的］观察采用体外冲击波（extracorporealshockent(ACL).［Method］Animalmodelofreconstructionoftheanteriorcruciateligamentin18healthyF/MNeonthsold)lyclassifiedinto2groups.TheESassontrichrometoinvestigatepathologychangeofthetendon-bonehealingtissue.Theinkintravasc

2、ularinjectioninationrevealedthatat4edinabundanceandtheperpendicularcollagenfibersentousinsertion)occurredinthelocalregionoftendon-boneinterface.Thehistologicalobservationsshoentcansignificantlyimprovethetendon-boneearlyhealingafterreconstructionoftheanteriorcruciateligamentinrabbits.Keyl/支）和速眠新（1.5

3、ml/支），1∶1混合，按0.2ml/kg肌注麻醉后，双后肢膝关节备皮，碘酒、酒精消毒，无菌手术巾覆盖。沿髌骨旁内侧缘做一纵行切口，长约2cm，切开关节囊，将髌骨翻向外侧，暴露兔膝关节ACL，与周围组织分离后，切除ACL。从肌肉肌腱联合处以远切取趾长伸肌腱而股骨端附着处保留完整，趾长伸肌腱断端使用4-0Ethibond缝合线编织缝合，并通过测量器测肌腱直径，采用与肌腱直径大小匹配的钻（2.0mm）建立股骨、胫骨隧道，将趾长伸肌腱的远端拉入股骨隧道内，经关节腔，穿过胫骨隧道拉出，并在胫骨嵴上钻孔，膝关节屈曲30°位，将肌腱牵引线在胫骨桥上打结固定（图1）。术毕检查重建韧带张力完好，逐层缝合切口

4、，并使用划线笔标记股骨和胫骨隧道部位。无菌敷料包扎伤口，实验动物不制动，放回饲养笼内。术后给予青霉素钠20万u肌注3d，每天检查实验动物的伤口及一般情况。图1兔趾长伸肌腱重建ACL的手术示意图1.3治疗方法1.3.1ESS公司Dolorclast放射冲击波治疗机，ACL重建术后24h在股骨隧道和胫骨隧道中部分别给予体外冲击波治疗，冲击波能流密度为0.16mJ/mm2，冲击量为500次（4Hz，3.5kPa）。1.3.2对照组术后不做冲击波治疗。1.4组织学评价1.4.1墨汁灌注术后2、4、8周时分别取实验兔6只，麻醉后，在一侧腹股沟区切开皮肤、皮下组织，游离股动、静脉，在股动脉向心插管，股静

5、脉离心插管，放血至兔循环停止，同时往动脉内注入肝素生理盐水（每500ml生理盐水中加入肝素12500U）冲洗血管，直至静脉流出无色液体时为止，然后从股动脉注入配好的复合墨汁（中华墨汁、甲醛及生理盐水体积比为3∶1∶6，每只约250ml），远端皮肤、趾甲均已变黑时结扎封闭静脉插管，当阻力增大肢体饱胀难以注入时停止灌注，封闭动脉插管保持血管内压力。通过墨汁灌注定量分析腱骨界面新生血管的含量，每一样本随机取5个部位使用OlympusDP70microscope观测，在40×放大视野下、同一曝光条件下照相，图像分析使用Image-ProPlus5.0image-analysissoft厚薄片，置于

6、载波片上。HE染色观察骨-肌腱界面处组织愈合过程中各种细胞的生长情况及新生血管的变化，Masson三色染色观察骨-肌腱界面处胶原纤维增生、排列分布的变化。1.5统计学分析有数据均以平均数±标准差表示，对照组与ESasson三色染色示对照组腱骨界面成纤维细胞增生，但胶原纤维含量少（图3a）；ESasson三色染色示对照组腱骨界面成纤维细胞增生，胶原纤维合成增多但排列不规则（图3c）；ESasson三色染色示对照组腱骨界面成纤维细胞数量减少，胶原纤维合成增多，排列较规则（图3e）；ESasson三色染色10×)图3b腱骨界面成纤维细胞大量增生，胶原纤维含量少，排列不规则(Masson三色染色10

7、×)图3c腱骨界面成纤维细胞大量增生，胶原纤维合成增加，但排列不规则(Masson三色染色10×)图3d腱骨界面胶原纤维大量增生，排列较规则(Masson三色染色10×)图3e腱骨界面成纤维细胞数量减少，胶原纤维合成增多、排列较规则(Masson三色染色10×)图3f腱骨界面胶原纤维大量增生、排列规则，与骨隧道紧密连接(Masson三色染色10×)2.2血管墨汁灌注观察新生血管对照组术后4、8周与术后2周相比