维药芹菜籽总黄酮含量测定及提取工艺研究

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1、维药芹菜籽总黄酮含量测定及提取工艺研究作者：乌莉娅沙衣提耿萍虞慧云【摘要】目的检测维药芹菜籽中总黄酮的含量,并优选其提取工艺。方法分别采用超声提取法和索氏提取法，用比色法比较维药芹菜籽中总黄酮的含量。结果以芦丁为对照品时，超声提取法测得芹菜籽中总黄酮的含量为19.61%；索氏提取法测得芹菜籽中总黄酮的含量为16.32%。结论超声提取法更为简便、稳定、可行、重现性好。【关键词】芹菜籽总黄酮提取　　Abstract：ObjectiveTodeterminethecontentoftotalflavonoidsandoptimizetheextra

2、ctingprocessinUygurmedicineCeleryseeds.MethodsThetethods:UltrasonicextractionandSoxhlet'sextracteretry.ResultsiningthecontentoftotalflavonoidsinCeleryseedsextractisconvenient,stable,practicible,andreproducible.　　KeygraveolensL.又名香芹、旱芹，是伞形科一年生或两年生草本植物，喜肥沃土壤，全国和世界各地均有栽培［1］。维药

3、芹菜籽是芹菜的干燥成熟果实。维医临床表明，其性二级干热，具有散气、消肿、止痛、利尿、降血压的作用。在维吾尔药中主要用于治疗高血压病、关节炎、类风湿关节炎、气滞性子宫炎、腹水、肾脏等疾病［2］。目前对其挥发油成分研究的比较多，其挥发油主要成分为α-芹子烯、柠檬烯、丁基苯酞等［3，4］。并且从其正丁醇部位分离出4个黄酮类化合物［5］，分别为：木犀草素3′O.D葡萄糖苷，木犀草素7O.D葡萄糖苷，香叶木素7O.D葡萄糖苷，柯伊利素。实验表明，芹菜中含有丰富的黄酮类化合物［6］，具有降压安神、降血脂、保护血管和增强免疫力

4、等功能［7］。但对其黄酮含量测定的研究还未见报道。本实验拟对两种方法提取物中总黄酮含量进行分析测定，旨在为维医临床用药及对芹菜的综合开发利用提供科学依据。　　1仪器与材料　　1.1仪器Spectrumlab54紫外分光光度计(上海市棱光有限公司);KQ-400DB型数控超声清洗器(昆山市超声仪器有限公司);电子天平(sartorius德国产);DZF-6021型真空干燥箱(上海精密实验设备有限公司);DRT-SX型恒温电热套（郑州长城科工贸有限公司）；RE-52旋转式蒸发器(上海亚荣生化仪器厂)；SHB-III循环水式多用真空泵（郑州长城科工

5、贸有限公司）。　　1.2材料芦丁标准品(中国药品生物制品检定所,0080-9705)；芹菜籽（购于新疆和阗维吾尔医院，由本校乌莉娅老师鉴定）；所用试剂均为分析纯。　　2方法与结果　　2.1样品溶液的制备　　2.1.1精密称取芹菜籽2g，置于干燥的索氏提取器中，用石油醚回流脱脂1h，弃去石油醚提取液。再加入甲醇20ml超声提取两次，时间分别为30，20min，超声温度为25℃，过滤并合并滤液。回收甲醇，挥干后用甲醇溶解，置于25ml容量瓶中加甲醇定容，摇匀。此为样品溶液Ⅰ。　　2.1.2称取芹菜籽细粉2g，于真空干燥箱中干燥6h，温度为60℃，

6、精密称定置于干燥的索氏提取器中,加入乙醚120ml，加热回流至提取液无色，放冷，弃去乙醚液，再加甲醇90ml，加热回流至提取液无色，过滤，将滤液回收甲醇，挥干后再用甲醇溶解，移至25ml容量瓶中，用少量甲醇洗涤容器，洗液并入容量瓶中，并定容［8］。此为样品溶液Ⅱ。　　2.2总黄酮的含量测定［9］　　2.2.1对照品溶液的制备取在120℃减压干燥至恒重的芦丁对照品20mg，置于100ml容量瓶中，加甲醇适量置水浴上微热使之溶解，放冷并稀释至刻度，摇匀，即得0.2mg/ml芦丁标准品。备用。　　2.2.2标准曲线的制备［10］及线性关系精密吸取上

7、述对照品液0.0，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0ml分别置于25ml容量瓶中，加蒸馏水至6ml，加5%亚硝酸钠溶液1ml，使混匀，放置6min，加10%硝酸铝溶液1ml，摇匀，放置6min，加4%氢氧化钠溶液10ml，再加水稀释至刻度，摇匀，放置15min。取出以第1份为空白溶液,在510nm处测吸光度，以浓度为横坐标，吸光度为纵坐标绘制标准曲线。结果见表1。　　表1标准曲线数据（略）　　以上表明在0.008～0.040mg·ml-1范围内，浓度和吸光度呈良好的线性关系。标准曲线方程为：A=14.925C-0.015，r=0.9996

8、　　2.2.3稳定性实验分别精密吸取样品溶液Ⅰ，Ⅱ各2ml，置于10ml具塞试管中，同制备标准曲线的操作，在0，15，30，45，60min测得吸光度，结果见表2。