耐亚胺培南铜绿假单胞菌的耐药特征及耐消毒剂基因的检测分析

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1、耐亚胺培南铜绿假单胞菌的耐药特征及耐消毒剂基因的检测分析作者：颜英俊糜祖煌刘华杨洋张凯杨明清黄文方【摘要】目的分析和调查我院2005年1月～12月临床分离34株耐亚胺培南铜绿假单胞菌对常用抗生素耐药特点以及耐消毒剂相关基因携带状况。方法应用BDPhoenix100全自动微生物分析仪进行细菌鉴定和17种药物敏感试验，头孢哌酮/舒巴坦采用KB法。用PCR方法检测季胺类(如苯扎溴铵)、双胍类(如氯己定)耐药相关基因qacEΔ1sul1。结果亚胺培南耐药铜绿假单胞菌除对阿米卡星100%敏感外，对哌拉西林、哌拉西林/三唑巴坦敏感率为48%～54%，对第三代及第四代头孢菌素、氨曲南和喹诺酮类等

2、抗菌活性差，敏感率为3%～29%，对美罗培南敏感率为29%，对氨苄西林/舒巴坦、氯霉素、四环素、复方磺胺甲口恶唑全部耐药。34株亚胺培南耐药铜绿假单胞菌有14株qacEΔ1sul1基因阳性，携带率为41.2%。结论本组亚胺培南耐药铜绿假单胞菌除对阿米卡星敏感外，对其它常用抗生素耐药严重，且耐消毒剂相关基因阳性携带率较高，应引起临床微生物和消毒界的重视。【关键词】铜绿假单胞菌亚胺培南消毒剂耐药基因InvestigationontheantimicrobialresistancecharacteristicsABSTRACTObjectiveToinvestigatetheantimi

3、crobialresistancecharacteristicsandtheconditionofdisinfectantresistantgene(qacEΔ1sul1)in34imipenemresistantPseudomonasaeruginosa.MethodThirtyfourstrainsfrompatientsfromJantoDec2005edbyBDPhoenix100automaticmicrobialanalysissystem,cefoperazone/sulbactamsusceptibilitytestedbyKirbyBauermethod.

4、TheqacEΔ1sul1geneethod.ResultsImipenemresistantPseudomonasaeruginosaikacin,48%～54%,respectively.Only3～29%andquinolones.Thereonasaeruginosasusceptibletomeropenemandallresistancetoamoxicillin/clavulanate,chloramphenicol,tetracyclineandtrimethoprim/sulfamethoxazole.Fourteenof34strainsonasaerugin

5、osatoimipenemisserious.ThereishighpositivepercentageofqacEΔ1sul1geneinimipenemresistantPseudomonasaeruginosa.KEYRSA中发现耐消毒剂基因qacA。细菌耐消毒剂为获得性的qac基因所致，其中qacEsul1基因由整合子介导，可被革兰阳性和革兰阴性菌广泛获取［4，5］。为了解我院耐亚胺培南铜绿假单胞菌(IMPRPa)的耐药特点及消毒剂磺胺耐药相关基因(qacEΔ1sul1)存在状况，我们进行了相关分析和研究，现总结报告如下。1材料和方法1.1菌株来源34株耐亚胺培南铜

6、绿假单胞菌来自于2005年1月～12月我院住院患者的临床分离标本(包括痰液、尿液、伤口分泌物、脓液、血液等)。1.2质控菌株铜绿假单胞菌ATCC27853和大肠埃希菌ATCC25922购自卫生部菌种保藏中心。1.3菌株鉴定及药敏试验方法所有菌株均以BDPhoenix100全自动微生物分析仪鉴定到种，必要时采用ATB或传统生化方法补充鉴定。采用BDPhoenix100配套药敏试验复合板，包括阿米卡星、氨苄西林/舒巴坦、氨曲南、头孢噻肟、头孢他啶、氯霉素、环丙沙星、庆大霉素、亚胺培南、左氧氟沙星、美罗培南、哌拉西林、哌拉西林/三唑巴坦、头孢吡肟、四环素和复方磺胺甲口恶唑共16种抗生素，头

7、孢哌酮/舒巴坦采用KB法，药敏标准按2005年版CLSI/NCCLSM100S15规定执行。1.4主要仪器设备与试剂Eppendorfcentrifuge5417R低温离心机，恒温金属浴(杭州大和公司)，MJPeltierThermalCycler(MJResearch)，BioRAD电泳仪，BioRAD凝胶成像系统，琼脂糖(Oxoid公司)，100bpDNALadderMarker(大连宝生物工程公司)，6×上样缓冲液(北京天为时代公司)，头孢哌酮