绵毛鹿茸草的次生代谢产物含量与抑菌活性分析

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1、绵毛鹿茸草的次生代谢产物含量与抑菌活性分析【摘要】［目的］绵毛鹿茸草的次生代谢产物含量与抑菌活性分析。［方法］对绵毛鹿茸草不同提取液的总黄酮、总绿原酸、总生物碱、总皂甙、游离蒽醌等次生代谢产物含量和抑菌活性进行测定。［结果］显示：70%乙醇提取液、60%丙酮提取液对肺炎双球菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌有中等抑制作用，水提取液有弱抑制作用；70%乙醇提取液是肺炎双球菌、金黄色葡萄球菌的良好抑制剂，60%丙酮提取液是大肠杆菌、枯草芽孢杆菌的良好抑制剂。［结论］绵毛鹿茸草提取掖对大肠杆菌的抑菌活性与绿原酸的含量具有显著的正性关，对枯草芽孢杆菌的抑菌活性与蒽醌之

2、间存在极显著的相关性。【关键词】绵毛鹿茸草；次生代谢；抑菌活性　　Abstract：［Objective］ToanalysethecontentofsecondarymetabolismsandantibacterialactivityofMonochasmaSavatieriFranch.exMaxim.［Method］Thecontentsof5secondarymetabolitessuchasflavonoid，chlorogenicacid，tannin，phenolandanthraquinonesinthedifferentextractsofMonoc

3、hasmasavatieriFranch.exMaximined.［Results］Itshooderate，asavatieriFranch.exMaximonEscherichiacoliandthecontentofthechologenicacid.TherearkedcorrelationbetonochasmaSavatieriFranch.exMaxim；secondarymetabolism；antibacterialactivity　　绵毛鹿茸草(MonochasmasavatieriFranch.exMaxim)为唇形科鹿茸草属植物，别名白头翁、千

4、重塔、白头毛，分布于浙江、福建、江西，常生于山坡向阳处杂草中或马尾松林下［1］。主要功能为清热解毒，祛风行气，凉血止血，祛痰，用于感冒，慢性气管炎，肺炎，咳血，吐血，便血，牙龈炎，牙髓炎，乳痈，痈肿，小儿口疮，风湿关节痛等。本文对绵毛鹿茸草的不同提取液中总黄酮、总绿原酸、总生物碱、总皂甙及其对肺炎双球菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌抑菌活性进行研究，并探讨这五类次生代谢产物与抑菌活性之间的相互关系。　　1实验与方法　　1.1实验材料和仪器绵毛鹿茸草于2007年6月采自浙江千岛湖姥山林场的山坡上。采集时将棉毛鹿茸草全草用湿布包裹，塑料袋封装，立即带回实验室。将

5、材料洗净，防入105℃恒温干燥箱中固定25min，再在80℃条件下干燥24h，研磨后经过0.25mm金属网筛，将烘干样品放入磨口广口瓶，置于干燥器中保存，备用［2］。标准品芦丁、绿原酸、小蘖碱、人参皂甙Rb，1，8二羟基蒽醌购自中国药品生物制品检定所，所用试剂均为分析纯。四种菌种均由浙江台州医院无偿赠送。培养基为牛肉膏培养基。吸光度的测定在T6新世纪紫外-可见分光光度计上完成。　　1.2绵毛鹿茸草提取液的制备称取绵毛鹿茸草粉末3份，每份1g，其中2份分别用70%乙醇、60%丙酮在80℃水浴中回流6h，进行提取，离心取上清液，并清洗残渣2次，离心取上清液，将3次上清液

6、合并；另1份用沸水进行提取0.5h，离心取上清液，反复多次，直至提取液色淡，并将几次沸水提取液混合。将乙醇、丙酮、沸水提取液的浓缩，并调节pH至7.0，然后用蒸馏水定容至1ml，放入4℃的冰箱中待用。　　1.3次生代谢产物含量的测定　　1.3.1总黄酮的提取与测定［3］取上述绵毛鹿茸草提取液样品0.2ml，挥去溶剂后用甲醇定容至25ml，取其中1ml，置10ml离心管中，加入4ml0.1mol/L三氯化铝-甲醇溶液，摇匀，在420nm处测定吸光度。以芦丁为标准品，其回归方程为y=9.6101x+0.0147，R2=0.9991。　　1.3.2总绿原酸的提取与测定［4］

7、取上述绵毛鹿茸草提取液样品0.2ml，挥去溶剂后用95%乙醇定容至25ml，取1ml，置25ml容量瓶中，加入0.2mol/LHCl定容至刻度，摇匀，以试剂空白为对照，在324nm处测定吸光度。以绿原酸为标准品，其回归方程为y=66.064x+0.0134，R2=0.9995。　　1.3.3总生物碱的抽提与测定［5］取上述绵毛鹿茸草提取液样品0.2ml，挥去溶剂后用90%乙醇定容至25ml。取提取液1.4ml置于精密加入4ml氯仿的分液漏斗中，加入7.2×10-4mol/L溴甲酚绿pH=4.42缓冲溶液0.6ml，振摇1min，静置1h，取澄清的氯仿