两株植物内生真菌次生代谢产物与抑菌活性的研究

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1、IlUllllIlllIIllIllll111IIIIll!Y1799324THESECoNDARYMETABoLITESANDANTIMICRoBIALANTIVITYoFENDoPHYTICFUNGIFRoMTWoMEDICINALPLANTSAThesisSubmittedtoShaanxiUniversityofScienceandTechnologyinPartialFulfillmentoftheRequirementfortheDegreeofMasterofScienceThesisSupervisor：Professor．MaYa

2、ngmin．May,2010两株植物内生真菌次生代谢产物及抑菌活性的研究摘要植物内生真菌是一种微生物资源，其能产生一系列具有多样性结构的抗菌活性物质。现今从植物内生真菌中得到的活性物质种类远比从土壤微生物中得到的要多。目前，植物内生真菌次生代谢产物抗菌活性的研究越来越受到人们的关注，其将成为新的天然抗菌药物的重要源泉，在新药开发上具有广阔的发展前景。本文以药用植物杜仲和无花果中的两株具有良好抗菌活性的内生真菌ERIO和FRl0为研究对象，通过对其次生代谢产物进行研究，以期寻找具有强抗菌活性的化合物。对来自杜仲的具有良好抗菌活性的菌株ERl0(镰孢霉

3、属Fusariumsp．)进行液体发酵，获得发酵物粗品(13．90g)，采用柱层析、薄层层析及重结晶等方法，获得4个化合物：化合物1(25mg)、化合物2(45mg)、化合物3(12mg)、化合物4(10mg)。经理化性质分析和波谱分析(1H-NMR、13C-NMR、DEPT和MS)，确定了化合物2～4的结构依次为：FumitremorginB，FumitremorginC和麦角甾醇。对来自无花果的具有良好抗菌活性的菌株FRl0(镰孢霉属Fusariumsp．)进行液体发酵，获得发酵物粗浸膏(5．20g)，采用柱层析、薄层层析及重结晶等方法，获得3

4、个化合物：化合物4(22mg)、化合物5(8mg)、化合物6(4mg)。经理化性质分析和核磁波谱分析，确定了化合物4和5分别为麦角甾醇和啤酒甾醇。测定了化合物1"-'4对5种细菌和11种真菌的最小抑制浓度(MC)，抗菌试验结果显示，化合物1，2，3对大部分测试菌具有较好的抗菌活性，化合物4对部分细菌有一定的抑制作用。其中化合物2对测试菌的抗菌活性最好，其对乳链球菌(StreptococcusLactis)的MIC为3．13“g／mL，而阳性对照硫酸链霉素对乳链球菌(StreptococcusLactis)的MIC为6．25pg／mL。关键词：内生真

5、菌，抗菌活性，次生代谢产物，最小抑菌浓度ⅡTHESECoNDARYMETABoLITESANDANTIMICRoBIALANTIVITYoFENDoPHYTICFUNGIFRoMTWOMEDICINALPLANTSABSTRACTEndophytesaremicrobialresourcewithpotentialappliedvalue，whichsometimesproduceanumberofantimicrobialnaturalproductswithdiversestructures．Thebioactivemetabolitesfro

6、mendophyticfungiaremuchmorethanthosefromsoilmicrobes．Theresearchforantimicrobialactivityofthemetabolitesbecomesmoreandmoreimportont，andthereisvastprospecttodevelopnewantimicrobialnaturalmedicinesfromtheendophyticfungi．ER10andFRIO，whichwereofstrongantimicrobialactivity,weresepe

7、ratelyisolatedfromEucommiaulmoidesolivandFtcUScaricaLinn．Tofindantimicrobialsubstances，thesecondarymetabolitesofERl0andFRl0wereresearchedinthisPaper．ERIOstrain(Fusariumsp．)withantimicrobialactivitywasfermentedinliquidculturemedium，andextractedtogive13．90gcrudeextract．Wimcolumn

8、chromatography,thinlayerpreparationchromatographyandre-crysta