卡立泊来德对离体肺缺血再灌注损伤的初步实验研究

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1、卡立泊来德对离体肺缺血再灌注损伤的初步实验研究作者：周荣华，陈果，蒲江涛，陈艳芳，刘馨烛，张艳菊，龙村，刘斌【摘要】目的研究选择性钠/氢离子(Na+/H+)交换阻断剂卡立泊来德(Cariporide)对离体大鼠肺缺血/再灌注损伤的防治效果。方法建立离体大鼠肺缺血再灌注损伤模型。18只SD成年大鼠随机分为3组，每组6只：对照组:采用含5％羟乙基淀粉的KHHB(Krebs-HenselEithydroxyethylamylopectinebuffer)灌注液持续平衡灌注、通气120min；缺血再灌注组:平衡30min后，缺血60min、再灌注30min；Cariporid

2、e组:平衡15min，给予Cariporide预处理15min，缺血60min、再灌注30min。持续监测并记录肺动脉压(PAP)；留取再灌注末灌注液,测定超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量；再灌注结束，测肺湿/干重比(DA含量、SOD活性和DA和ETHODSTheisolatedlungischemia/reperfusionmodelslydividedintothreegroups:thecontrolgroup(n=6),theischemia/reperfusiongroup(n=6)andthecariporidegroup(n=6).In

3、thecontrolgroup,theisolatedratlungsylopectinebuffer(KHHB)solutionfor120min.Intheischemia/reperfusiongroup,theisolatedratlungsinafter60minofischemia．Inthecariporidegroup,cariporideinisteredintheKHHBsolutionbeforeischemia.Pulmonaryarterypressure(PAP)onitored.TheKHHBsolutionat30minofrepefu

4、sionseasurethemalondialdehyde(MDA)contentandsuperoxidedismutase(SOD)activity.Afterreperfusion,easured.Themorphologicchangesicroscopes.RESULTSPAP,MDAandDAandDA)含量，黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶(SOD)活性，SOD、MDA试剂盒购于南京建成公司。再灌注结束，结扎左肺门，用分析天平称量左肺湿重，70℃24h烘干后称干重，两者之比为肺组织湿/干重比(×1cm×1cm小块肺组织，采用4%多聚甲醛固定,脱水，石蜡包

5、埋，切片后HE染色，光镜下观察肺形态学变化；同时取1mm×1mm×1mm小块肺组织，3％戊二醛固定，常规脱水、包埋和切片，醋酸铀-枸橼酸铅复染，透射电镜下观察肺组织超微结构变化。　　1.4统计方法数据均以(±s)表示，采用SPSS11.0统计分析软件，组间比较采用方差分析和q检验，P<0.05为组间差异有显著性意义。　　2结果　　2.1再灌注肺动脉压(PAP)变化平衡过程中，三组大鼠基础PAP值无统计学差异（P>0.05）。再灌注过程中，缺血再灌注组与Cariporide再灌注各监测时点的PAP均较正常对照组显著增高（P<0.05），但Caripor

6、ide组PAP数值显著低于同时点缺血再灌注组（P<0.05）。见图1。　　图1各组再灌注肺动脉压变化值（略）　　注*与正常组比较P<0.05；＃与缺血再灌注组比较P<0.05　　2.2灌注液MDA、SOD含量和肺组织DA、DA、DA、SOD含量和肺组织湿/干重比(ooreTM［8］等研究显示，NHE抑制剂Amiloride通过拮抗NHE1能显著降低肺毛细血管通透系数，减轻急性肺损伤。肺缺血再灌注后肺损伤另一主要病理变化为肺表面活性物质减少、炎性细胞激活及过氧化损伤［9］。本实验中，与缺血再灌注组相比，Cariporide组光镜下炎性细胞浸润及电镜下肺

7、表面活性物质存在形式的Ⅱ型肺泡上皮细胞板层体排空、数目减少的程度也有所减轻，且增加SOD活性、降低MDA。综上所述，Cariporide降低缺血再灌注导致的肺动脉高压、肺水肿、过氧化损伤，减轻离体大鼠肺缺血再灌注损伤。　　研究表明细胞内钙超载是导致肺缺血再灌注损伤的重要机制，传统的钙拮抗剂阻断Ca2+内流，可减少肺缺血再灌注损伤［10］。但细胞内钙超载不仅是钙离子通道本身作用的结果，事实上从病理生理学角度分析，细胞不同离子通道之间也具有明显的相互影响作用［11］。NHE1广泛分布在肺泡上皮细胞的基底膜［4］，在正常情况下，NHE1对调节肺泡细胞内pH