两种方法研究新型光敏剂五聚赖氨酸2羰基酞菁锌与牛血清白蛋白相互作用

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1、两种方法研究新型光敏剂五聚赖氨酸2羰基酞菁锌与牛血清白蛋白相互作用作者：李春艳，阮冠宇，单丽，陈锦灿，黄明东【摘要】　　目的研究新型光敏剂五聚赖氨酸2羰基酞菁锌（ZnPc(Lys)5）与牛血清白蛋白（BSA）之间的相互作用。方法从BSA角度采用荧光光谱法和紫外可见光谱法通过荧光猝灭实验探讨ZnPc(Lys)5与BSA相互作用的猝灭机制、结合常数及结合位点；从ZnPc(Lys)5角度采用胶束荧光增敏法测定ZnPc(Lys)5浓度通过Scatchard方程计算ZnPc(Lys)5与BSA相互

2、作用的结合常数和结合位点数。结果荧光猝灭实验结果表明ZnPc(Lys)5对BSA的荧光有强烈的猝灭作用，猝灭机制主要是静态猝灭形成基态配合物。不同温度（298，303，308，313，318K）的结合常数K1分别为12.1×104L/mol，7.69×104L/mol，6.12×104L/mol，4.57×104L/mol，3.76×104L/mol，结合位点数分别为0.93，1.02，1.07，1.13，1.17。Scatchard方程计算出298K结合常数K2为1.557×105L/mol，结合位点

3、数位1.07。结论从两个方面计算的结合常数和结合位点数基本一致，ZnPc(Lys)5与血清白蛋白之间主要通过形成基态配合物的方式相互作用，进入血清白蛋白中1个结合位点。【关键词】光敏感药；光谱法，荧光；分光光度法，紫外线；锌；聚赖氨酸；吲哚类；血清白蛋白，牛　　InteractionofPentalysineβcarbonylphthalocyanineZincAlbumin:Tacy,FujianMedicalUniversity,Fuzhou350004,China;Departmentofph

4、armacy，FujianMaternalandChildHealthHospital，Fuzhou,350001,China;StateKeyLaboratoryofStructuralChemistry,FujianInstituteofStructureofMatter,ChineseAcademyofSciences,Fuzhou,350002,China　　ABSTRACT:ObjectiveToinvestigatetheinteractionofpentalysineβcarbonylp

5、hthalocyaninezinc(ZnPc(Lys)5)albumin(BSA)bytethods.MethodsFromthepointofBSA,thequenchingmechanism,bindingconstantsandsitesoftheinteractionbetentbyfluorescencespectrometryandUVvisiblespectroscopy.FromthepointofZnPc(Lys)5,theconstantsandsitesoftheinterac

6、tionicellarenhancedspectrofluorometricdeterminationofZnPc(Lys)5concentrationechanismoffluorescencequenchingisstaticquenchingprocess.Thebindingconstantsandthenumberofbindingsitesperatures(298,303,308,313,318K):12.1,7.69,6.12,4.57,3.76×104L/moland0.93,1.02

7、,1.07,1.13,1.17,respectively.ThebindingconstantandthenumberofbindingsitescalculatedfromScatchardequationat298Koland1.07,respectively.ConclusionThetethodsproduceapproximatelyidenticaldataofthebindingconstantandsites.TheresultsindicatethatZnPc(Lys)5strongl

8、ybindstoBSAatamolarratioof1∶1.　　KEYilliporeQ超纯去离子水（18.20mΩ）。　　1.2方法　　1.2.1荧光猝灭法　　在离心管中分别加入终浓度2.5μL/mol的脱脂BSA储备液，分别精确加入10μLZnPc(Lys)5系列标准溶液，用Tris缓冲液补足至500μL，摇匀、静置10min后，取200μL加入96孔荧光板中，以290nm作为激发波长，测定300～500nm荧光发射光谱