硫化氢对大鼠离体心脏低温保存效果的实验研究

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1、硫化氢对大鼠离体心脏低温保存效果的实验研究作者：白崇峰，崔勤，李亮，李彤【摘要】目的观察硫化氢（H2S）对大鼠离体心脏的保护作用。方法将48只SD大鼠随机分成对照组（ST组）和实验组（HST组），每组24只，分别采用St.ThomasⅡ液和St.ThomasⅡ液+H2S为停搏液及保存液，保存心脏4h，6h，8h。采用Langendorff心脏灌注和工作模型装置进行心脏保存前及保存后再灌注30min心功能测定,比较心功能恢复率、心肌含水量、心肌酶［乳酸脱氢酶（LDH）及磷酸肌酸激酶（CK）］漏出量以及心肌组织超微

2、结构变化。结果保存4h、6h后，HST组心功能指标及心肌含水量与ST组差别无统计学意义，但心肌酶漏出量明显减少；保存8h后HST组所测各指标均优于ST组。结论加入H2S的St.ThomasⅡ液可以提高大鼠离体心脏的保存效果。【关键词】硫化氢；心脏移植；器官保存；大鼠　　Abstract:OBJECTIVEToobservetheprotectiveeffectsofhydrogensulfideonisolatedrathearts.METHODSForty-EightSDratslyassignedtotas

3、Ⅱsolutionandpreservedinthesamesolution;studygroup（HSTgroup，n=24）,theheartsasⅡplushydrogensulfide(H2S)solutionandpreservedinthesamesolution.Allratheartsia,andunderinreperfusion(37℃).Theisolatedheartseleakage，yocardiumandcardiacultrastructureeasuredafterreperf

4、usion.RESULTSAftertheheartsyocardialfunctionandyocardiumeasuredasⅡsolutioncouldenhancethemyocardialprotectiveeffectstotheisolatedrathearts.　　Keyation-like）状态，中心体温、代谢率、氧耗量均大幅度下降。设想用H2S作为心脏保存液的添加成分会产生较好效果，本实验采用Langendorff离体大鼠心灌注模型,在St.ThomasⅡ液中添加H2S的供体NaHS，选择不

5、同的保存时间做比较，对H2S在心脏保存中的作用进行初步的探索。　　1材料与方法　　1.1保存液的配制对照组（ST组）为St.ThomasⅡ停搏液及保存液，具体组成成份：NaCl(120mmol/L),KCl(16mmol/L)，MgCl2(16.6mmol/L)，CaCl2(1.2mmol/L)，NaHCO3(10mmol/L)，pH7.8，渗透压295～296mOsm/L。实验组（HST组）采用St.ThomasⅡ液+H2S为停搏液及保存液，含4×10－1mmol/LNaHS（约相当于10倍生理浓度）的St.

6、ThomasⅡ液，NaHS由HCl和Na2S在使用前临时配制。　　1.2实验分组健康SD大鼠48只，雌雄各半，体重180～220g，随机分成ST组和HST组，每组24只，分别保存心脏4h，6h，8h（每个保存组8只）。　　1.3离体心脏灌注模型大鼠称重后,戊巴比妥钠（65mg/kg）腹腔内注射麻醉，尾静脉注射质量浓度为10g/L的肝素抗凝（0.12ml/只）。剪开胸骨，迅速切取心脏，放入0℃～4℃K－H液中，冲洗残留在主动脉内的血液,迅速移至Langendorff灌注装置上，用37℃（95%O2和5%CO2预充

7、30min）K－H液顺行灌注,灌注压维持在90cmH2O，肺动脉根部切开,使冠状动脉回流液充分引流。从开胸到开始灌注的时间保持在70s以内。灌注5min后，切开左心耳,经左心房、二尖瓣,将连接有测压导管的心室球囊送入左心室，另一端连接多导生理记录仪。往心室球囊内缓慢注射适量生理盐水（40～60μl），使左心室舒张末压保持在10mmHg。15min左右待心脏搏动达到稳定状态，测定血流动力学基础值，30min后,逐渐降低灌注温度至30℃以下，按分组经主动脉根部分别灌注4℃的心脏保存液（80ml/kg）使心脏停跳，在

8、相应的保存液中分别保存4h（n=8）、6h（n=8）、8h（n=8）后，重新开始心脏灌注，逐渐恢复灌注温度至37℃。约15～20min后，心脏搏动可达到稳定状态。复灌30min后测定心功能和冠状动脉流出量，计算恢复率，留取冠状静脉流出液备用。心脏灌注60min后，在左心室上取一块约300mg心肌组织，保证每次切取位置尽可能一致，称重后放入80℃的烘箱中烘烤24h,再次称重，计算心肌含水