不同季节虎杖根茎与茎叶中大黄素含量变化研究

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时间:2018-05-02

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1、不同季节虎杖根茎与茎叶中大黄素含量变化研究:胡冠宇,夏醒醒,尹政,陈勤【摘要】目的通过测定药用植物虎杖在不同季节时其不同生长部位中的有效成分大黄素含量及其变化规律,旨在为虎杖的最佳采收时间提供依据。方法采用高效液相色谱法,Diamonsil-C18(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱,甲醇-0.1%磷酸(80∶20)为流动相;检测波长:254nm;流速:1.0mL/min;柱温:27℃;进样量:20μL。结果通过测定不同季节虎杖的茎叶与根中的大黄素含量,发现根中大黄素含量最高,且大黄素含量在8月最高。结

2、论虎杖在生长发育过程中,大黄素含量变化是有规律的,可根据其根中的大黄素含量确定最佳的采收时间。【关键词】虎杖;大黄素;采收时间;高效液相色谱法Abstract:ObjectiveTofindthechangingregularityofemodincontentindifferenttissuesofPolygonumcuspidatumgatheredindifferentseasonsbyHPLC,sotodecidethebestgatheringtime.MethodsTheseparationed

3、onDiamonsil-C18(250mm×4.6mm,5μm)column,usingmethanol-0.1%H3PO4(80∶20)asmobilephase,detectedat254nm.ThefloL/min,thecolumntemperatureongtherhizomeandstemleafofPolygonumcuspidatum,thecontentofemodinintherhizomeodinodinchangesregularlyintheprocessofgroentofPol

4、ygouumcuspidatum,ThebestgatheringtimecouldbedeterminedbytheemodincontentintherhizomeofPolygouumcuspidatum.  Keycuspidatum;emodin;gatheringtime;HPLC虎杖(PolygonumcuspidatumSieb.etZucc.)是蓼科蓼属多年生草本植物,在我国有广泛的分布,常见于江苏、浙江、安徽、山东、广东、广西、四川、陕西、云南、贵州等地。传统药用部分为其干燥根和根茎,性

5、味苦寒,具有祛风利湿、祛痰止咳、清热解毒、活血化瘀等功效。其主要化学成分有蒽醌、酚性物质及黄酮类化合物等,其中蒽醌类化合物主要有大黄素、大黄素甲醚、大黄酚等。大黄素有较广泛的生物活性,具有抑菌、抗炎、免疫调节和抗肿瘤等作用[1]。由于大黄素具有显著的药理学功效,故有着广泛的应用。传统经验认为,大多数根茎类中药都在春秋季节时采挖,因为在这个季节里中药材中的有效成分往往贮藏于根中。《中药大辞典》也记载虎杖的根及根茎应在春秋二季采挖[2]。然而,植物在其生长发育过程中,体内合成的次生代谢物质(包括有效成分或称生物

6、活性成分)随着季节的变化,其不同生长部位的含量可能存在很大的差异,仅凭经验模式采挖,并不一定适合所有的中药材,药材质量也就无法得到保证。本试验采用高效液相色谱(HPLC)法测定虎杖的根茎和叶部位中大黄素的含量,通过跟踪观测安徽合肥地区3-9月间虎杖中大黄素含量的动态变化,以期为确定虎杖的最佳采收季节提供依据。  1材料Agilent1100series高效液相色谱仪;色谱柱:DiamonsilC18(250mm×4.6mm,5μm);Agilent色谱化学工作站。大黄素对照品(中国药品生物制品检定所提供,供

7、含量测定用,批号756-9203);虎杖药材采于安徽省委党校植物园,经本实验室鉴定为虎杖PolygonumcuspidatumSieb.etZucc.。甲醇为色谱纯;水为重蒸水;其余试剂均为分析纯。精密称取大黄素对照品1.0mg,以甲醇溶解并定容至10mL,摇匀,配成100μg/mL的溶液。  2.3供试品溶液的制备[3]取虎杖茎叶与根适量,分别干燥研细,过60目筛,精密称取约0.1g,加入三氯甲烷25mL和2.5mol/L硫酸溶液20mL,称定重量,置80℃水浴回流2h,冷却后称重,用三氯甲烷补足失重,摇

8、匀,分取三氯甲烷,精密量取10mL,水浴蒸干,残渣加甲醇使溶解,定容至10mL,用0.45μm微孔滤膜滤过,备用。  2.4线性关系试验取100μg/mL的对照品溶液,用甲醇稀释为100、16.67、8.33、1.67、0.83μg/mL,按上述色谱条件测定,每个浓度重复3次,进样量为20μL。以对照品峰面积积分值为纵坐标,以进样浓度为横坐标进行线性回归,得回归方程为:Y=134405X+16.119(R=0.9

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