mta1 mrna与ki67蛋白在乳腺癌组织中的表达及临床意义

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1、MTA1mRNA与ki67蛋白在乳腺癌组织中的表达及临床意义【摘要】目的：观察MTA1mRNA与ki67蛋白在乳腺癌组织中的表达，探讨二者与乳腺癌的相关性。方法：应用原位核酸分子杂交检测乳腺癌组织中MTA1mRNA的水平，应用免疫组织化学技术检测乳腺癌组织中ki67蛋白的表达，分析二者与乳腺癌的相关性。结果：MTA1mRNA、ki67蛋白在乳腺癌低分化组的表达明显高于高、中分化组（P<0.01），淋巴结转移组明显高于无淋巴结转移组（P<0.01）。MTA1mRNA、ki67蛋白在c-erbB2阳性组的表达水平高于

2、c-erbB2阴性组（P<0.01），MTA1mRNA、ki67蛋白在ER阳性组的表达水平低于ER阴性组（P<0.05）。ki67蛋白与MTA1mRNA的表达呈正相关，r=0.553。结论：MTA1mRNA和ki67蛋白的表达与乳腺癌的发生、发展密切相关，可以作为判断乳腺癌预后的重要分子标志物。【关键词】乳腺肿瘤·MTA1mRNA·ki67蛋白　　【ABSTRACT】Objective:ToobservetheexpressionsofMTA1mRNAandki67inbreastcancertissueandt

3、oinvestigatetherelationbetRNAandki67RNAandki67inthepoorlydifferentiatedgroupofbreastcanceroderatelyandRNAandki67ingroupshavinglymphnodesmetasisphnodesmetasisgroups（P<0.01）.TheexpressionsofMTA1mRNAandki67RNAandki67RNAandki67arecloselyrelatedentandprogressofbreast

4、cancer,acpanyingordifferentiationextents.MTA1mRNAandki67canbetheimportantmolecularmarkersentofbreastcancer.　　【KEYTA1mRNA·ki67　　　　远处转移是乳腺癌患者死亡的主要原因［1］。如何减少肿瘤细胞的远处转移是提高手术成功率和患者存活率的关键。转移相关基因蛋白（metastasis-associatedgenesprotein，MTA）是一个不断快速增长的基因家族，由一组（70~80）×103多肽组成，现已确

5、认3类（MTA1、MTA2和MTA3）。ki67蛋白是一种与增殖细胞相关的核抗原，可以较好地反映细胞的增殖活性，ki67蛋白的表达与恶性肿瘤的发展、转移及预后有关［2］。本研究应用原位核酸分子杂交方法检测乳腺癌组织中MTA1mRNA的表达，应用免疫组织化学染色检测ki67蛋白的表达，分析MTA1mRNA、ki67蛋白与乳腺癌临床病理因素之间的关系，以及MTA1mRNA与ki67蛋白间的关联，探讨MTA1mRNA和ki67蛋白在乳腺癌发生、发展过程中的作用。　　1　资料与方法　　1.1　一般资料　　　选取扬州大学第一附属医院普

6、外科2006年1月—2008年1月手术切除的乳腺癌组织标本90例，均为女性，年龄28~69岁，平均年龄45.2岁。TNM分期：Ⅰ～Ⅱ期63例，Ⅲ～Ⅳ期27例；组织学类型：浸润性导管癌80例，浸润性小叶癌8例，髓样癌2例；腋窝淋巴结有转移31例，无转移59例。组织学分级：高、中分化58例，低分化32例。ER阳性组32例，ER阴性组58例。c-erbB2阳性组35例，c-erbB2阴性组55例。全部病例均经病理组织学确诊，且术前均未接受化疗、放疗或内分泌治疗等辅助治疗。　　1.2　方法　　　标本经石蜡包埋后作4μm厚连续切片，行

7、HE染色、原位核酸分子杂交和免疫组织化学检测。　　1.2.1　MTA1mRNA原位杂交　　　根据GenBank中人MTA1全长cDNA序列（NM-004689）及shRNA的设计原则［3］，用BI391DNA合成仪（美国PE公司生产）合成MTA1mRNA寡核苷酸探针，采用德国BoehringerMannheim公司3’-digoxigenin-VN试剂盒标记。组织切片浸入二甲苯10min移除石蜡，以100%乙醇浸泡10min×2次，空气干燥10min，在浓度为95%、80%、70%的乙醇中分别浸泡1min。PBS冲洗5min

8、×3次，在2×SSc孵育10min，每张切片滴加40μL预杂交液，室温孵育2h；甩干杂交溶液，滴加30μL探针杂交液（内含20ng地高辛标记的MTA1mRNA），4℃湿盒内孵育3h。振荡漂洗切片后滴加显色液，封片剂封片。　　　　阳性染色为细胞质内见棕黄色颗粒，信号越强，颜色越深。阴性对照片