端粒酶逆转录酶基因htert在膀胱移行细胞癌组织中的表达意义

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1、端粒酶逆转录酶基因hTERT在膀胱移行细胞癌组织中的表达意义　　摘要:目的研究端粒酶逆转录酶基因hTERT在膀胱移行细胞癌（TCC）中的表达，探讨其在TCC发生、发展及预后复发中的意义.方法采用兔抗人hTERT多克隆抗体及S-P免疫组化法检测在56例TCC及10例正常膀胱组织中的表达.结果hTERT在TCC中阳性表达率为64.3%，与在正常膀胱组织表达率0%相比，有显著性差异（P<0.05）.hTERT在Ⅰ，Ⅱ和Ⅲ级TCC中的表达率分别为43.8%（7/16），57.7%（15/26），100%（14/14）.Ⅰ与Ⅲ级、Ⅱ与

2、Ⅲ级、Ⅰ+Ⅱ与Ⅲ级比较差异显著（P<0.05）.hTERT在浅表性及浸润性TCC中的表达率为53.1%（17/32），79.2%（19/24），两者差异显著（P<0.05）.hTERT阳性表达率与患者复发有显著相关性（P<0.05）.结论hTERT表达异常可能与膀胱肿瘤的发生、发展有关.检测hTERT表达可作为预测膀胱肿瘤预后复发的潜在指标.　　Keys;telomerase;geneexpression;immunohisto-chemistryAbstract:AIMToinvestigatetheexpre

3、ssionofhumantelomerasereversetranscriptasegene（hTERT）andtoevalu-ateitsclinicalsignificanceintheoccurrence，developmentandrecurrenceofbladdertransitionalcellcarcinoma（TCC）patients.METHODSUsingS-Pimmunohistochemicalmethod，beddedTCCtissuesandin10casesofnormalbladdertissue

4、s.Theirclinicalsignificancealbladdertissuesrespectively（P<0.05）.hTERTproteinposi-tivestainingongsuperficialandinvasivetumororgenesisandprogressionofTCC.ThehighlyexpressionofhTERTgenemightberegardedasamarkerfortherecurrenceofTCC.　　0引言　　端粒酶活性的异常表达与肿瘤发生、发展密切相关，编码端粒酶相关

5、组分的基因被激活后，肿瘤细胞中的端粒长度才能稳定到一定程度，使细胞获得无限增殖的能力，已研究发现端粒酶的激活与膀胱癌细胞的生物学行为密切相关［1］.但在肿瘤形成过程中激活端粒酶的基因改变还不清楚，端粒酶的相关基因成为肿瘤研究的新热点之一.现研究发现人端粒酶逆转录酶（humantelomerasereversetranscriptase，hTERT）基因是端粒酶活性的限制性组分，在肿瘤组织中的表达明显高于正常组织，提示hTERT基因和端粒酶一样可作为肿瘤诊断的有力佐证［2］.为探讨hTERT基因在膀胱肿瘤形成中的作用，寻找更理想的膀

6、胱肿瘤诊断标志和治疗靶点，我们检测了hTERT在获得随访结果的56例膀胱移行细胞癌（bladdertransitionalcellcarcinoma，TCC）和10例正常对照组中的表达，探讨其在TCC发生、发展及复发中的作用.　　1材料和方法　　1.1材料56例TCC为中国医科大学第二临床学院泌尿外科收治手术切除标本.其中，男35例，女21例，年龄35～76岁，平均发病年龄61.9岁.常规固定，石蜡包埋，制成5μm厚连续切片，HE染色复查证实诊断，均有确切的随访记录（25～55mo）.病理分级按分期标准:浅表性肿瘤（Tis-T1）

7、32例，浸润性肿瘤（T2-4）:24例.另选10例活检正常膀胱粘膜对照.兔抗人hTERT多克隆抗体（美国SantaCruzBiotechnologyInc.dilution1∶50）.S-P试剂盒（北京中山生物技术公司）.DAB（Fluka，Sin，染色步骤按说明书进行.阴性对照为PBS代替一抗的空白对照和正常兔血清替代一抗的替代对照，正常对照为活检正常膀胱粘膜组织.细胞无棕色反应或背景同空白对照者为阴性（-）;细胞呈清晰棕色反应者为阳性，根据阳性肿瘤细胞所占比例及表达强度分为:（+）细胞呈淡棕黄色或阳性细胞率<25%者;（

8、）细胞呈棕黄色颗粒或阳性细胞率25%～50%者;（）细胞呈深棕黄色颗粒或阳性细胞率>50%者.　　统计学处理:计算阳性率，阳性率比较采用χ2的确切概率法检验.　　2结果　　2.1hTERT蛋白表达的定位与分布hTERT阳性着色主要定位于肿瘤细